Comment extraire des saponines de Tribulus Terrestris?

Tribulus terrestris, also known as tribulus, hard tribulus, or white tribulus....... Bitter, pungent, warm in nature, slightly toxic, enters the liver channel. Used to treat headache and dizziness, wind rash and itching, chest and hypochondrium distending pain, breast obstruction and mastitis, red eyes and eye obstruction, consumptive-thirst, etc. 1]. Studies have confirmed that Tribulus terrestris extract, especially tribulus terrestris saponins, has pharmacological effects such as improving cardiovascular health, enhancing sexual function, lowering blood lipids, lowering blood sugar, anti-aging, and anti-tumor [2].

L’extraction et l’analyse des principes actifs de Tribulus terrestris constituent la base d’une utilisation et d’une recherche ultérieures. Cet article passe en revue les méthodes d’extraction pour les saponines tribulus totales et l’analyse du contenu et les méthodes de test. En comparant les différentes méthodes d’extraction et en analysant les avantages et les inconvénients de chaque méthode, une base est fournie pour d’autres recherches sur les saponines tribulus.

1 méthodes d’extraction des saponines totales dans tribulus terrestris

Selon les rapports de la littérature [4-8], les méthodes d’extraction des saponines totales dans Tribulus terrestris utilisent principalement des méthodes d’extraction au solvant. Les méthodes d’extraction au solvant peuvent être résumées comme l’extraction au solvant traditionnelle [145], l’extraction par micro-ondes [67] et l’extraction par ultrasons [8] (l’extraction par micro-ondes et l’extraction par ultrasons peuvent être considérées comme des méthodes modernes d’extraction par solvant). Cet article sera expliqué selon les trois méthodes ci-dessus.

1.1 méthode traditionnelle d’extraction au solvant

The solvent extraction method is based on the principle of like dissolves like, and the chemical components are extracted from the raw material by selecting an appropriate solvent. Saponins are generally soluble in water, methanol and dilute ethanol, easily soluble in hot water, hot methanol and hot ethanol, and insoluble in ether, chloroform and benzene. Among them, ethanol and water are often used to extract saponins. There are many traditional methods for extracting saponins, such as the maceration method, the decoction method, and the reflux extraction method. The alcohol precipitation method using water as the solvent is generally used to Extrait total de saponines tribulus. The method uses water as a solvent, reflux extraction, filtration and concentration to obtain the extract. Then, ethanol of different concentration gradients is added to the extract. Usually, when the alcohol content is 40% to 80%, components such as starch, polysaccharides, dextrin, amino acid gum mucilage, and protein can be removed, and the saponin remains in the filtrate [3]. There are also alcohol extraction methods, such as the alcohol extraction column method and the alcohol extraction concentration method.

Wang Xiaoyang et al. 14 used the alcohol extraction column method, with ethanol as the solvent for reflux extraction. In the orthogonal test method for the preferred extraction process of tribulus terrestris saponins, three methods were used, of which the alcohol extraction column method was refluxed with 70% ethanol for 3 times, 2h each time, treated with macroporous adsorption resin, concentrated and dried to obtain the product. The results showed that the content of saponin in the dried Tribulus terrestris extract was 43.23%, and the extraction rate was 80.31%. Cao Zhenyan et al. [5 used an orthogonal experiment with an alcohol concentration method to determine that the best process for extracting tribulus saponins is to reflux 75% ethanol three times for 1 hour each time. The result was a total saponin content of 52. 19%. Both methods have a high extraction rate, but generally have more impurities and can be used for industrial production. In short, the traditional solvent extraction method is generally used to extract total tribulus saponins because of its advantages of being simple to operate and low cost. However, it also has some disadvantages, such as a long extraction time and low safety.

1.2 méthode d’extraction par micro-ondes

L’extraction assistée par micro-ondes est une nouvelle méthode d’extraction qui utilise des micro-ondes pour extraire des substances. Dans cette méthode, des micro-ondes rayonnent dans le solvant et passent à travers la paroi cellulaire pour atteindre l’intérieur de la cellule. Puisque les solvants polaires et les fluides cellulaires absorbent l’énergie des micro-ondes, la température à l’intérieur et à proximité de la cellule augmente, et la pression de vaporisation augmente. Lorsque la pression dépasse la capacité portante de la paroi cellulaire, la paroi cellulaire se rompt et les principes actifs situés à l’intérieur de la cellule sont libérés de la cellule et transférés au solvant.

Cette technologie est adaptée à l’extraction de substances naturelles, et peut répondre aux exigences de rendement élevé, de vitesse et de sélectivité sans restrictions. Li et al. [6 ont utilisé une méthode orthogonale pour optimiser les conditions d’extraction de l’euphol. Les conditions optimales du procédé étaient un volume d’échantillon de 0,18 à 1,15 mm, un temps d’extraction de 5 minutes, une puissance micro-ondes de 500 W, un rapport solide-liquide de 1:20 (g·mL-¹) et une teneur en stérols mesurée de 91,3%. Par conséquent, l’extraction assistée par micro-ondes est plus rapide et plus efficace que les méthodes traditionnelles, avec les avantages de même chauffage, économie de solvant, processus simple, et large application. Cependant, il présente encore certaines limites en théorie et en application. À l’heure actuelle, la technologie et les équipements d’extraction à micro-ondes sont rarement utilisés dans la production industrielle et doivent être davantage encouragés [7].

1.3 méthode d’extraction par ultrasons

Les ondes ultrasonore produisent un effet de cavitation rapide et fort et une action d’agitation, rompant les cellules dans les herbes médicinales et faisant pénétrer le solvant dans les cellules, accélérant ainsi la dissolution des ingrédients efficaces des herbes médicinales dans le solvant. L’application de cette technique dans l’extraction d’ingrédients médicamenteux naturels s’est développée plus largement au cours des dernières années. Dans l’extraction des saponines, la destruction de la structure de l’aglycon peut être évitée. Par rapport à la méthode conventionnelle, l’extraction par ultrasons présente des avantages évidents en termes de temps et de vitesse d’extraction. Cette technique a également été utilisée dans de nombreuses études pourextract total tribulus saponins....... Zhang Juhong et al. [8 ont utilisé l’extraction ultrasonique avec de l’éthanol dilué comme solvant pendant 30 minutes pour mesurer la teneur totale en saponines totales dans Tribulus terrestris. Et ensuite purifié à l’aide d’une résine d’adsorption macroporeuse. La première série de données a montré que la teneur maximale en saponines de tribulus totales était de 2,8%. Cette méthode réduit non seulement le temps d’extraction et améliore le taux d’extraction, mais garantit également que l’extraction par ultrasons ne modifie pas la structure des ingrédients actifs. Par conséquent, l’extraction assistée par ultrasons est l’une des méthodes modernes d’extraction au solvant couramment utilisées.

En résumé, en comparant et en analysant les trois méthodes d’extraction différentes ci-dessus, leurs avantages et inconvénients respectifs peuvent être vus, ce qui fournit une référence pour l’extraction efficace des saponines totales de Tribulus terrestris. Voir tableau 1.

2 méthodes d’analyse et d’essai pour les saponines totales de Tribulus terrestris

Les méthodes courantes pour l’analyse des saponines totales de tribulus terrestris comprennent la spectrophotométrie ultraviolet-visible [10-13], la chromatographie liquide haute performance [14.5], l’électrophorèse capillaire [161, etc. De plus, la méthode de la puce de papier devrait également être appliquée à la détermination des saponines totales du tribulus terrestris.

2.1 spectrophotométrie ultraviolette visible

La méthode spectrophotométrique ultraviolette est la méthode la plus commune pourDétermination de la teneur en saponines tribulus totales....... Cette méthode permet non seulement de mesurer les substances colorées, mais aussi de mesurer avec précision les substances incolores avec des structures conjuguées [9]. Li Yan et al. [10 ont utilisé la saponine monomère de Tribulus terrestris comme substance de référence, le réactif de couleur était un réactif E et une solution d’éthanol d’acide sulfurique, la longueur d’onde de détermination était de 520 nm, et les résultats ont montré qu’il y avait une bonne relation linéaire entre la quantité de la substance de référence et la valeur d’absorbance dans la plage de 0,06 à 0,2 mg. Li Ying et al. En comparant les différences de qualité de Tribulus de différentes origines, la teneur totale en saponine dans les fruits de Tribulus a été déterminée à l’aide d’un spectrophotomètre UV-Vis. En utilisant la diosgénine comme substance de référence, le choix du révélateur de couleur a été exploré en utilisant HCIO₄: vanillin (5%) comme 4:1. Les résultats ont montré que la diosgénine avait une bonne relation linéaire entre 7,52-150,4 μg, avec un taux de récupération élevé et une forte stabilité.

Zhang Ping et al. [12 ont utilisé la spectrophotométrie ultraviolette pour déterminer la teneur totale en saponine chez Tribulus de différentes origines. Le Tribulus terrestris a été utilisé comme substance témoin, et les résultats ont montré que la relation linéaire était bonne dans la gamme de 7,52-150,4 μg. Zhang Sujun et al. [13 ont utilisé la spectrophotométrie ultraviolette avec la diosmine comme substance de référence et une longueur d’onde de détection de 310 nm et un colorateur de HCIO₄ pour déterminer la teneur totale en saponine dans les fruits, les tiges et les feuilles de Tribulus terrestris à différentes périodes de récolte afin de comparer les résultats. Il a été constaté que la teneur totale en saponine des tiges et des feuilles de Tribulus terrestris était beaucoup plus élevée que celle des fruits, et que la teneur totale en saponine des tiges et des feuilles était la plus élevée en juillet. En bref, la méthode spectrophotométrique ultraviolette présente les avantages d’un équipement et d’un fonctionnement relativement simples, d’un faible coût, d’une vitesse d’analyse rapide et d’une sensibilité élevée par rapport à d’autres méthodes d’analyse spectroscopique, de sorte qu’il est souvent utilisé pour l’analyse de la saponine.

2.2 chromatographie liquide haute performance

Avec la vulgarisation de la chromatographie liquide haute performance, de plus en plus de composants de saponine sont détectés à l’aide de cette méthode. La chromatographie liquide à haute performance utilise un liquide comme phase mobile, et une pompe de perfusion à haute pression est utilisée pour transporter un solvant unique ou mélangé, un tampon ou une autre phase mobile, entraînant le déplacement de l’échantillon à tester, de sorte que les composants sont séparés. Un détecteur très sensible le transforme en signal détectable, permettant une analyse qualitative et quantitative. Parmi eux, le détecteur doit être déterminé par les conditions de laboratoire et les propriétés de la saponine elle-même. Pour certaines saponines comme la diosgénine, qui n’ont pas d’absorption ultraviolette caractéristique et ne peuvent pas être détectées à l’aide d’un détecteur ultraviolet, un détecteur de diffusion de la lumière devrait être utilisé. Li Haoyue et al. 114 ont utilisé la CLHP combinée à la colorimétrie pour contrôler la qualité de Tribulus terrestris. Le Welch Ultimate LP-Ci La colonne 8 a été utilisée avec du méthanol: eau (80:20) comme phase mobile. Des saponines de Tribulus terrestris ont été détectées et étudiées en utilisant la saponine de Tribulus terrestris comme indice. Les résultats ont montré que tant dans la méthode HPLC que dans la méthode colorimétrique, la saponine Tribulus a une bonne relation linéaire entre 0,820 et 7,380 μg et 24,600 et 86,100 μg, avec un taux de récupération moyen de 99,3% et 99,5%. La méthode est caractérisée par être simple et facile à exécuter, rapide, avec une efficacité de séparation élevée, une sensibilité élevée, et des résultats de mesure précis. Il est approprié pour la détermination du contenu de Tribulus.

2.3 électrophorèse capillaire

L’électrophorèse capillaire est une technique de chromatographie liquide dans laquelle des ions ou des particules nucléaires sont entraînés par un champ électrique à haute tension et séparés dans un capillaire. Parmi eux, l’électrophorèse capillaire à haute efficacité est largement utilisée. Dans l’analyse de la médecine traditionnelle chinoise et des médecines naturelles, qu’il s’agisse de l’analyse d’herbes brutes ou de médicaments finis, avec ses avantages uniques en matière de séparation et d’analyse, il y a eu des progrès dans la séparation et la détermination quantitative des composants efficaces de la médecine traditionnelle chinoise et des médecines naturelles [161. Avec la popularité croissante de la technologie CE, elle est supérieure à la HPLC en termes de coût expérimental, d’efficacité de séparation, de vitesse de séparation, de microquantification et d’adaptabilité. Il présente les avantages d’une efficacité d’analyse élevée, un petit volume d’injection, une opération simple, un faible coût d’analyse et la colonne capillaire n’est pas facilement contaminée. [171. La loi sur la protection des données. Cette méthode a été largement utilisée dans la séparation et la détermination du contenu des ingrédients actifs des médicaments naturels. Cependant, il existe actuellement peu de rapports sur l’utilisation de l’électrophorèse capillaire pour détecter les saponines totales de Tribulus terrestris.

2.4 méthode de détermination des puces de papier

Paper chip microfluidic technology is a new type of microfluidic technology that is widely used in medical diagnosis, food safety testing, environmental monitoring and other fields due to its simple and fast processing, ease of use, and low cost. The basic principle is to form channels on the paper surface to guide the fluid I18]. Among them, forming channels on filter paper with hydrophobic materials is currently the most commonly used method, that is, drawing a hydrophilic-hydrophobic contrast map on the paper to create micron-scale capillary channels on the paper [19]. Solutions can be driven to specific areas by capillary force, so no external equipment is required. The commonly used detection methods mainly include photometric detection [201, fluorescence, electrochemiluminescence, and electrochemical detection methods, among which photometric detection is the most intuitive and commonly used method.

Wu Jian et al. [2 used a paper chip to detect the effective ingredient phloretin in Fructus Gardeniae and achieved satisfactory results. Hao Zhenxia et al. 1221 used a microfluidic paper chip to rapidly detect the content of tea polyphenols in order to eliminate the difference in color development time during the test. Using this method, different diluted tea samples were rapidly tested within 3 minutes of the start of the color development reaction, and the results obtained were in good agreement with the conventional method. According to a large number of literature reports, paper chip microfluidic technology, compared with the standard method, greatly shortens the time, does not require professional laboratory equipment, and can be used for on-site detection, which has certain practical application value. Therefore, paper chips can be used in the rapid analysis and detection of traditional Chinese medicine, and have broad application prospects. At present, there is no literature reporting the detection of tribulus terrestris total saponins, et cette méthode peut devenir un champ de recherche pionnier dans la détermination analytique.

3 Conclusion et perspectives

A comparison of the advantages and disadvantages of the three methods for extracting tribulus terrestris total saponins can provide a reference for related researchers, who can choose the appropriate extraction method according to different needs. The ultraviolet spectrophotometry and high-phase liquid chromatography methods for testing tribulus terrestris total saponins have been widely used because of the advantages of their popular instruments and equipment and simple operation. Capillary electrophoresis and paper microfluidic technology are emerging separation and analysis techniques. Capillary electrophoresis has broad application prospects in the analysis of natural medicines, and significant progress has been made in this area. Paper microfluidic technology has been used in various fields of research due to its advantages of being fast and simple. With the development of science and technology, extraction methods and detection techniques will continue to improve and better serve the research and development of natural medicines and traditional Chinese medicine.

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