Quels sont les avantages de l’extrait de Tribulus Terrestris?

Tribulus terrestris, également connu sous le nom de Tribulus, Tribulus blanc, Tribulus terrestris, zhixing, Et etpangtong, est une herbe annuelle qui pousse bien dans les sols secs, meuble, sableux. La Chine est abondante dans Tribulus terrestris, qui est principalement distribué dans le Shaanxi, Henan, Shandong, Jiangsu, Sichuan et d’autres endroits [1]. Des études pharmacologiques ont montré que Tribulus terrestrisa les fonctions de soulager la stagnation du foie, de favoriser la circulation sanguine et de favoriser le qi, de soulager les démangeaisons et de décourager le vent, de dégager l’esprit et de nourrir les yeux, et peut être utilisé pour traiter les vertiges, maux de tête, douleur hypochondrique, serrement de la poitrine, yeux rouges et démangeaisons, et d’autres conditions[2]. Les flavonoïdes du Tribulus terrestris sont une classe importante de substances actives naturelles du Tribulus terrestris, principalement sous forme de glycosides, tels que le kaempférol, la quercétine et l’isorhamnétine [3]. Ils ont des effets anti-inflammatoires, antibactériens, antioxydants et protecteurs sur les systèmes cardiovasculaire et nerveux [4]. Cet article examine principalement les méthodes d’extraction et les activités pharmacologiques des flavonoïdes du Tribulus, en vue de fournir une référence théorique pour l’utilisation complète des ressources du Tribulus dans les domaines de l’alimentation, de la médecine, de la chimie fine et d’autres domaines.

1 détermination de la teneur en flavonoïdes Tribulus

Les flavonoïdes de Tribulus sont pour la plupart des cristaux, quelques-uns étant des poudres amorphes. Les méthodes de détermination de la teneur en flavonoïdes de tribulus comprennent la chromatographie liquide à haute performance (HPLC), la chromatographie liquide à haute performance - détecteur de diode (HPLC-DAD), la chromatographie liquide à haute performance - méthode d’évaluation multiple et la méthode colorimétrique. Shile et al. ont utilisé la chromatographie liquide haute performance en phase renversée pour déterminer la teneur en flavonoïdes du Tribulus terrestris, y compris la quercétine 1,59 mg/g, le kaempférol 0,35 mg/g et l’isorhamnétine 0. 575 mg/g. Xie Shiquan et al. [6] 1671 ont utilisé la CLHP pour déterminer la teneur en flavonoïdes de Tribulus terrestris de différentes origines, jusqu’à 15. 59 mg/g. Li Chunna et al. [7] ont utilisé HPLC-DAD pour déterminer la teneur en quercétine, kaempférol et isorhamnétine de 207,9, 264,6 et 614,0 μg/g, respectivement. Li Suying et al. [8] ont utilisé HPLC-QAMS pour déterminer le contenu de 10 ingrédients dans les pilules de Buzheng Bizi, y compris 0,665 mg/g de saiyuanziside, 0,235 mg/g de baicaleine 7-O-β-D-glucoside, 0,212 mg/g de baicaleine, 0,141 mg/g de baicaline, 0,127 mg/g de baicaline, 0,431 mg/g de naringénine, 0,268 mg/g de naringénine, 0,061 mg/g de nobilétine, 0,048 mg/g d’atractylénolide, , hesséridine 0. 268 mg/g, nobilétine 0. 061 mg/g, atractylenoide III 0. 048 mg/g, atractylenoide I 0. 041 mg/g.

2 méthode d’extraction de Tribulus terrestris flavone

2. 1 extraction par Reflux

Xiao Tianmei et al. [9] ont porté à reflux et extrait la totalité des flavonoïdes de l’herbe entière de Tribulus terrestris. Le solvant d’extraction était une solution d’éthanol à 57%, le rapport matière/liquide était de 1:20 (g/mL), la température d’extraction était de 72 °C, le temps d’extraction était de 3 h et la teneur totale en flavonoïdes était de 4,46 %. Shu Guowei et al. [10] ont utilisé de l’éthanol à 85% comme solvant d’extraction, un rapport matière/liquide de 1:27,5 (g/mL), une température d’extraction de 85°C et un temps d’extraction de 2 h, avec un rendement total en flavonoïdes de 0,785%. Zhao Ming et al. [11] ont utilisé un essai orthogonal pour optimiser le processus d’extraction des flavonoïdes totaux du Tribulus terrestris: éthanol à 70%, le temps d’extraction 1,5 h, la température d’extraction 70-75 °C, le rapport liquide/matière était de 1:15 (g/mL), et la teneur totale en flavonoïdes dans l’herbe du Tribulus terrestris pouvait atteindre 7,15 mg/g.

Li Junling et al. [12] ont utilisé le rendement en extrait et la teneur totale en flavonoïdes comme indicateurs d’évaluation pour concevoir un essai orthogonal visant à optimiser le processus d’extraction des flavonoïdes totaux de Tribulus terrestris. La substance médicinale a été extraite trois fois avec une solution d’éthanol à 80% en 10 fois, et le temps d’extraction a été de 3 h. La teneur totale en flavonoïdes a été de 1,74 mg/g. Sun Yao-ran et al. [13] ont conçu un essai orthogonal pour optimiser le procédé d’extraction totale des flavonoïdes de Tribulus terrestris: solution d’éthanol à 70%, rapport liquide 1:25 (g/mL), temps d’extraction 10 h, extraction 4 fois, teneur totale en flavonoïdes 1,72 mg/g. La méthode d’extraction par reflux présente les avantages d’un équipement simple, d’un faible coût et d’une opération facile. En outre, cette méthode présente les avantages de moins de résidus de solvant et de moins de pollution, et est universelle. L’inconvénient est que le temps d’extraction est relativement long.

2.2 méthode d’extraction assistée par ultrasons

Xiao Tianmei et al. [14] ont étudié le procédé d’extraction assistée par ultrasons deTribulus terrestris flavonoïdes totaux: température d’extraction 70 °C, temps ultrasonique 40 min, 80% d’éthanol, rapport liquide 1:20 (g/mL), et la teneur en flavonoïdes totaux de Tribulus terrestris était de 5. 59 mg/g. Yang Xuemiao et al. [15] ont optimisé le procédé d’extraction des flavonoïdes totaux de Tribulus terrestris par une méthode de surface de réponse assistée par ultrasons: le solvant eutectique (avec une teneur en eau anhydre de 31%) était composé de bétaïne, de L-proline, de 1,3-butanediol dans un rapport de 0,5:0,5:2. Le rapport massique entre le solvant eutectique et le Tribulus terrestris était de 50:1, et le temps ultrasonique était de 53 minutes. L’extraction totale de flavonoïdes était alors de 10,82 mg/g.

Gui Hai Shui et al. [16] ont utilisé une méthode d’extraction assistée par ultrasons pour extraire les flavonoïdes du Tribulus terrestris. Le rapport de la poudre sèche de Tribulus terrestris à 60% de méthanol était de 1:60 (g/mL), et l’extraction a été effectuée une seule fois avec un temps d’échographie de 30 minutes. Les teneurs en isorhamnetin-3-O-β-D-rutinoside et en isorhamnetin-3-O-β-D-gentiobioside ont été mesurées à 15,59 mg/g et 15,59 mg/g, respectivement. Les composants flavonoïdes du Tribulus terrestris ont été extraits à l’aide d’une méthode à ultrasons avec du méthanol comme solvant d’extraction et rapport liquide 1:50 (g/mL), temps ultrasonique 30 min. La teneur en flavonoïdes du Tribulus terrestris était de 15,59 mg/g. La méthode d’extraction assistée par ultrasons a non seulement les avantages du temps d’extraction court, de l’opération commode et du coût bas, mais peut également éviter les dommages des composants efficaces provoqués par le chauffage.

2.3 méthode d’extraction assistée par micro-ondes

Zhang Jian et al. [17] ont utilisé la méthode de surface à réponse assistée par micro-ondes pour optimiser le processus d’extraction des flavonoïdes totaux de Tribulus terrestris: 70% d’éthanol, la température d’extraction 70 °C, le temps d’extraction 20 min, le rapport matiére/liquide 1:70 (g/mL) et le rendement d’extraction 0,69%. Yang Li et al. [18] ont conçu un essai orthogonal pour optimiser le procédé d’extraction par micro-ondes des flavonoïdes totaux de Tribulus terrestris: 70% d’éthanol, le temps d’extraction 50 min, le rapport liquide/solide 1:30 (g/mL), le rendement en flavonoïdes totaux de Tribulus terrestris 5,09%. L’extraction assistée par micro-ondes présente les avantages d’être facile à utiliser, de temps d’extraction court, de chauffage uniforme et d’économie de solvants, et est largement utilisée dans l’extraction d’ingrédients actifs à partir de produits naturels.

2. 4 méthode de Cellulase

Shu Guowei et al. [19] ont utilisé une méthode de cellulase pour extraire les flavonoïdes du tribulus terrestris: le solvant d’extraction était l’eau, la température d’extraction était de 55 °C, le pH de 5,0, le rapport matière/liquide 1:15 (g/mL), le dosage enzymatique 3,5%, le temps de traitement enzymatique 2,5 h, le taux d’extraction atteignant 0,2023%. La méthode cellulase présente les avantages d’un temps d’extraction court, d’une sélectivité élevée et de conditions de réaction légères, et est donc de plus en plus appréciée.

3 activité pharmacologique des flavonoïdes de tribulus terrestris

3. 1 anti-inflammatoire

Les flavonoïdes de Tribulus terrestris ont une activité anti-inflammatoire et peuvent améliorer le corps et#39; S immunité. Tian et al. [20] ont déterminé l’activité anti-inflammatoire des flavonoïdes de tribulus terrestris en mesurant le degré de gonflement de l’oreille chez les souris avant et après l’application de différentes concentrations de flavonoïdes de tribulus terrestris aux oreilles. Lorsque le test microbien rapide (RMM) atteint 25 g/kg, les flavonoïdes du Tribulus terrestris ont un effet anti-inflammatoire similaire à celui de l’aspirine. Abbas et al. [21] ont testé l’effet inhibiteur des flavonoïdes de tribulus terrestris extraits avec différents solvants sur l’hémolyse des cellules sanguines veineuses humaines. Lorsque le solvant était le méthanol, 400 μg/mL de flavonoïdes pouvaient effectivement inhiber 68,5 % de la dénaturation de l’albumine dans le sang humain et de l’albumine dans l’œuf, et présentaient une bonne activité anti-inflammatoire. Sudheendran et al. [22] ont utilisé un modèle d’œdème de patte de rat induit par le carraghénane pour étudier les effets inhibiteurs de la racine et des fruits de Tribulus terrestris sur l’œdème des rats albinos.#39; Pattes arrière gauche. La racine présentait un taux d’inhibition de 64,2 % et le fruit un taux d’inhibition de 28,57 %.

3. 2 antibactérien

Les flavonoïdes de Tribulus terrestris ont des effets antibactériens et bactéricides....... Tian et al. [23] ont utilisé la méthode de dilution sur microplaques pour déterminer l’activité antibactérienne du Tribulus terrestris, où les flavonoïdes ont montré une bonne activité antibactérienne contre les bactéries gram-négatives et gram-positives, avec des valeurs cmi de 0,07 à 0,15 mg/mL. Lubna et al. [24] ont constaté que les flavonoïdes de Tribulus terrestris ont un fort effet antibactérien, qui est dû au fait que les flavonoïdes de Tribulus peuvent former des complexes avec des protéines solubles extracellulaires et des parois cellulaires bactériennes pour inhiber et tuer les bactéries. Gomathi et al. [25] ont constaté que l’eau et les extraits d’éthanol de tribulus terrestris contiennent des alcaloïdes, des tanins, des flavonoïdes, des quinines et des composés phénoliques, qui peuvent inhiber la croissance de bactéries et de champignons sélectionnés. L’extrait d’eau avait une activité antibactérienne plus forte que l’extrait d’éthanol.

3. 3 antioxydant

Les flavonoïdes de Tribulus terrestris sont des antioxydants naturels avec une structure unique et un mécanisme d’action. Tian et al. [20] ont utilisé 10,47 μg/mL de la concentration demi-inhibiteur de 2,2⁃ diphényl ⁃1⁃picrylhydrazyl (DPPH) et 7,99 μg/mL de la concentration demi-inhibiteur de l’acide benzoïque pour déterminer l’activité antioxydante de l’extrait de tribulus terrestris à l’aide du réactif 2,2⁃azino⁃bis⁃3⁃ éthylbenzothiazoline (ABTS). L’extrait de flavone de Tribulus terrestris a montré une bonne activité antioxydante. Hifnaw et al. [26] ont utilisé la méthode DPPH pour mesurer l’activité antioxydante du tribulus flavone et des acides phénoliques extraits dans différents solvants. Parmi eux, les flavonoïdes extraits avec l’éthanol, le n-butanol et l’acétate d’éthyle avaient une très bonne capacité de récupération des radicaux libres, avec des concentrations demi-inhibitrices de (0,064 ± 0,002), (0,240 ± 0,056) et (0,280 ± 0,004) mg/mL,respectivement. Ils peuvent être utilisés comme capteur de divers oxydants (anions superoxydes, radicaux hydroxyles, radicaux peroxyles, etc.), ainsi que comme extinction de l’oxygène singlet. Kancheva et al. [27] ont utilisé la méthode rapide des radicaux DPPH pour évaluer l’efficacité des flavonoïdes dans le piégeage des radicaux libres, et la quercétine avait la plus forte activité de piégeage des radicaux libres.

3. 4 protéger le système cardiovasculaire

Les flavonoïdes de Tribulus terrestris présentent une bonne activité pharmacologique dans la protection du système cardiovasculaire. Turing [28] a testé le mice&#On a enregistré le temps nécessaire pour que les souris meurent d’hypoxie dans un espace sec et confiné en leur injectant différentes doses de flavonoïdes du tribulus. Par rapport au groupe témoin à blanc, une certaine relation dose-dépendante a été observée. Qi Qi Et al. [29] ont observé qu’après avoir pris Eucommia ulmoides-Tribulus terrestris pendant 6 semaines, la tension artérielle systolique et diastolique dans le groupe Eucommia ulmoides-Tribulus terrestris était significativement inférieure à celle du groupe à blanc (P< 0,05). El⁃Shaibany A et al. [30] ont mesuré la glycémie à jeun des lapins avant et après avoir pris 5 mg/kg de glyburide et 250 mg/kg de flavonoïdes de Tribulus terrestris pour étudier l’activité anti-hyperglycémique des flavonoïdes de Tribulus terrestris. Par rapport au groupe à blanc, le groupe glibenclamide et le groupe tribulus terrestris flavonoïdes ont réduit significativement la glycémie. Une dose unique de tribulus terrestris flavonoïde A réduit la glycémie à jeun des lapins à un niveau comparable à celui du groupe glibenclamide, et est revenue au niveau initial (0 h) dans les 2 heures, montrant un bon effet hypoglycémique.

3. 5 protéger le centre nerveux

Les maladies neurodégénératives sont caractérisées par la perte massive de neurones spécifiques, ce qui peut entraîner une perte de mémoire à court terme et des troubles cognitifs [31]. Chauhdary et al. [32] ont utilisé une alzheimerand induite par le chlorure d’aluminium et#39; S maladie du rat modèle pour mener une étude. Les rats ont reçu par voie orale 100, 300 ou 1 000 mg/kg de flavonoïdes du tribulus terrestris pendant 21 jours, les rats et#39; Le comportement d’exploration et le comportement d’inclinaison de la tête ont été considérablement améliorés (P< 0,001). En ce qui concerne les paramètres biochimiques, par rapport au groupe témoin, l’activité de l’acétylcholinestérase dans le groupe traité par les flavonoïdes tribulus terrestris a été significativement restaurée, montrant un bon effet neuroprotecteur.

4 perspectives

A l’heure actuelle, de nombreux résultats de recherche ont été obtenus sur la détermination de la teneur en flavonoïdes du tribulus terrestris, les méthodes d’extraction, la séparation et la purification, et les tests d’activité. Cependant, elles n’ont pas encore été appliquées à grande échelle dans le traitement clinique et la transformation ultérieure des produits. Avec l’amélioration du niveau de vie, les gens et#La sensibilisation à la santé est de plus en plus forte, et les flavonoïdes du tribulus terrestris ont de larges perspectives d’application dans les domaines de l’alimentation, de la médecine, de la chimie fine, etc.

Référence:

[1] SEMERDJIEVA I B, ZHELJAZKOV V d.constitutifs chimiques, propriétés biologiques et utilisations de Tribulus terrestris: un examen [J]. Natural product communications, 2019, 14 (8) :1934578, 1986839.

[2] Commission nationale de la pharmacopée. Pharmacopée du peuple ' république de Chine: partie I [M]. Beijing: Chine Medical Science and Technology Press, 2020: 352.

[3] XU D D, WANG Y, GUO W J, et al. Analyse multiomique des tissus cérébraux basée sur LC⁃MS⁃ pour l’évaluation du potentiel d’attaque ischémique de Tribulus terrestris L.fruit extrait chez des rats MCAO [J]. Arabian journal of chemistry, 2022, 15 (11) : 104297.

[4] ABDULQAWI L N A, QUADRI S A.Evaluation des activités antibactériennes et antioxydantes de Tribulus terrestris L. fruits [J].Research journal of pharmacy and technology, 2021, 14(1) : 331-336.

[5] Shi Q, Yu B, Xu L, et al. Détermination de la teneur en trois aglycones de flavonoïdes hydrolysés dans Tribulus terrestris par chromatographie liquide haute performance en phase inversée [J]. Journal of Pharmaceutical Analysis, 1999(2): 75⁃78.

[6] Xie S, Li R. Comparison of the composition of Tribulus flavonoids from different origins [J]. Pharmacien chinois, 2015(10): 1671 ⁃ 1673.

[7] Li Chunna, Fan Bingduo, Shi Xiaojuan, et al. Détermination de la teneur en trois glycosides flavonoïdes hydrolysés acides dans les tiges et les feuilles de Tribulus terrestris par HPLC-DAD [J]. Chinese Medicine Herald, 2015 (1): 33-36.

[8] Li Suying, Zhang Mingliang. Détermination simultanée de 10 ingrédients dans Buyi Zhiwei Wan par HPLC-QAMS [J]. Journal de l’université pharmaceutique de Shenyang, 2021 (12): 1286-1295.

[9] Xiao Tianmei, Jin Lijie. Détermination de la teneur totale en flavonoïdes chez Tribulus terrestris par spectrophotométrie [J]. Journal of Inner Mongolia University for the Nationalities (édition des sciences naturelles), 2015(6): 518-521.

[10] Shu Guowei, Chen He, He Xuexian, et al. Optimisation des conditions d’extraction des flavonoïdes totaux de Tribulus terrestris [J]. Food Industry Science and Technology, 2009(9) : 186⁃ 187, 190.

[11] Zhao Ming, Zhu Sanpu, Yang Chao, et al. Etude du procédé d’extraction des flavonoïdes totaux de Tribulus terrestris [J]. Shizhen Traditional Chinese Medicine, 2010(7) : 1728⁃ 1729.

[12] Li Junling, Wang Dawei. Optimisation du procédé d’extraction des flavonoïdes totaux de Tribulus terrestris par conception orthogonale [J]. Sichuan Traditional Chinese Medicine, 2008(12): 63⁃64.

[13] Sun Yoran, Guo Nana, Yuan Xubao, et al. Optimisation du procédé d’extraction par reflux des flavonoïdes totaux de Tribulus terrestris par conception orthogonale [J]. Innovation technologique industrielle, 2014 (4): 428⁃431.

[14] Xiao Tianmei, Chen Yuhua, Cheng Zhe. Etude sur le procédé d’extraction des flavonoïdes de Tribulus terrestris [J]. Journal de l’université de Mongolie intérieure pour les nationalités (édition des sciences naturelles), 2019 (6): 517⁃520.

[15] Yang Xuemiao, Xu Nanbing, Yang Dan, et al. Application de l’extraction par solvant eutectique naturel assisté par ultrasons dans l’extraction des flavonoïdes de Tribulus terrestris L. [J]. Industrie chimique moderne, 2022(S2): 239⁃243.

[16] Gui H S, Liu T H, Qin L L, et al. Détermination simultanée de trois flavonol glycosides dans les tiges et les feuilles de Tribulus terrestris par HPLC [J]. World Science and Technology⁃ modernisation of Traditional Chinese Medicine, 2014(5): 1055⁃1059.

[17] Zhang J, Tan J C, Yang Y R, et al. Optimisation du procédé d’extraction des flavonoïdes et des saponines de Tribulus terrestris par la méthodologie de la surface de réponse [J]. Chemical Technology, 2020(6): 6-12.

[18] Yang Li, Wang Chunyu, Han Mei, et al. Optimisation du procédé d’extraction des flavonoïdes totaux et des saponines totales de Tribulus terrestris [J]. Journal of Jilin Agricultural University, 2009(1) :45⁃ 50.

[19] Shu Guowei, Chen He, He Xuexian, et al. Etude sur l’extraction enzymatique de tribulus flavone [J]. Food Science and Technology, 2009(8) : 127⁃ 130.

[20] TIAN C L, CHANG Y, ZHANG ZH, et al.technologie d’extraction, analyse des composants, activités antioxydantes, antibactériennes, analgésiques et anti - inflammatoires de la fraction de flavonoïdes de Tribulus terrestris  L. quitte [J]. Heliyon, 2019, 5(8) :e02234.

[21] ABBAS M W, HUSSAIN M, AKHTAR S, et al. Bioactive compounds, antioxidant, anti⁃ inflammatoire, anti⁃cancer, and toxicity assessment of Tribulus terrestris— in vitro and in vivo studies[J].antioxidantes,2022, 11(6) : 1160.

[22] SUDHEENDRAN A, SHAJAHAN M A. activité anti-inflammatoire de la racine et du frutt de gokshura (Tribulus terrestris linn.) Chez les rats albinos [J]. International journal of ayurveda and pharma research,2017,5(7) : 1 ⁃ 4.

[23] TIAN C L, ZHANG ZH, WANG H et al. Technologie d’extraction, analyse des composants et activités antioxydantes et antibactériennes in vitro des flavonoïdes totaux et des acides gras de tribulus terrestris L. fruits[J]. La chromatographie biomédicale,

2019, 33(4) :e4474.

[24] FATIMA L,  À propos de SULTANA A, A, À propos de nous S, et  Al.Pharmacological activities of Tribulus terrestris linn: a systemic review[J]. World journal of pharmacy and pharmaceutical sciences,2015,4(2) : 136⁃ 150.

[25] GOMATHI S, SHANMUGAPRIYA A, BHARATHI V, et al. Activité antimicrobienne et études phytochimiques d’extraits de fruits aqueux et éthanoliques de Tribulus terrestris[J].IJPI'S journal of pharmacognosy and herbal formulations, 2012, 2 (8) :47-51.

[26] HIFNAWY, ABOUZID S, ALI Z Y, et al. Contenu phénolique et activité de piégage in vitro des radicaux libres de l’extrait alcoolique des fruits de Tribulus terrestris L[J].pharma in⁃novation journal,2015,4 :92⁃ 100.

[27] KANCHEVA V, NENADIS N,TSIMIDOU M, et al.propriétés antioxydantes du Tribulus terrestris de Bulgarie et activité de ramassement des radicaux de ses composants flavonoïdes [J]. La rivista italiana delle sostanze grasse,2007, 84 :210-219.

[28] Qu N. étude sur les ingrédients actifs flavonoïdes de Tribulus terrestris L. [D]. Shenyang: université de médecine traditionnelle chinoise du Liaoning, 2007: 21⁃25.

[29] QI Y Z, YANG X S,JIANG Y H, et al.étude du mécanisme sous-jacent aux effets antihypertenseurs d’eucommia ulmoides et Tribulus terrestris basée sur une analyse de l’intestin microbiote Et métabonomique [J]. BioMed research international,2020(4) : 1 ⁃ 12.

[30] EL⁃SHAIBANY A, AL⁃HABORI M, AL⁃TAHAMI B, et al.activité antihyperglycémique de Tribulus terrestris L extrait de partie aeriale dans le glucose⁃ lapins normaux chargés [J]. Tropical journal of pharmaceutical research,2016, 14(12) :2263.

[31] UDDIN M S, AL MAMUN A, HOSSAIN M S, et al.exploration de l’effet de Phyllanthus emblica L. sur la performance cognitive, les marqueurs antioxydants du cerveau et l’acétylcholinestérase Activité: Chez le rat: prometteur Don naturel pour l’atténuation de la maladie d’alzheimer [J]. Annals of neuro sciences,2016,23(4) :218⁃ 229.

[32] CHAUHDARY Z, SALEEM U, AHMAD B, et al. Évaluation neuroprotectrice de Tribulus terrestris L.in la maladie d’alzheimer induite par le chlorure d’aluminium [J]. Pakistan journal of pharmaceutical sciences,2019, 32(2) : 805-816.