Comment immobiliser la poudre de papaïne?

La papaïne [EC 3.4.22.2] is an important biochemical product with widespread applications in the food and pharmaceutical industries, as well as in feed, textiles, and leather processing [1]. Due to the high cost of papain and its inability to be reused, researchers have been exploring the preparation of immobilized papain. This research began in the early 1960s and has since been extensively documented in the literature [2]. The main methods for enzyme immobilization include embedding, adsorption, covalent bonding, and cross-linking, each with its own advantages and disadvantages [3]. This paper summarizes recent research and application progress on immobilized papain, compares the enzymatic characteristics such as enzyme activity, stability, and recovery rate of immobilized papain prepared using various immobilization methods in recent years, and provides suggestions.

1 méthode d’intégration

Procédé d’incorporation: le procédé d’incorporation d’enzymes ou de cellules bactériennes contenant des enzymes dans un support poreux pour fixer des enzymes est appelé procédé d’incorporation. L’incorporation de Gel est un procédé d’incorporation d’enzymes dans la structure microporeuse de divers gels pour produire des enzymes immobilisées d’une forme spécifique. Les gels les plus couramment utilisés sont l’agar, l’agarose, l’alginate de calcium, le carraghénane et le polyacrylamide.Intégration de microcapsulesL’invention concerne l’encapsulation de l’enzyme dans une membrane polymère semi-perméable pour produire des enzymes immobilisées par microcapsule.

1.1 papaïne immobilisée à l’alginate-chitosane de Sodium (IPSAC)

L’acide alginique est extrait des algues brunes et est un polysaccharide composé d’acide glucuronique lié par des liaisons β-1,4. C’est un support idéal pour l’encapsulation d’enzymes, avec une méthode d’immobilisation simple, des conditions légères, et des opérations qui peuvent être menées à la température ambiante, ayant pour résultat une inactivation d’enzymes minimale. Cependant, les gels alginates de calcium sont instables dans des solutions contenant des anions polyvalents (phosphates, citrates, lactates, etc.) et des concentrations élevées d’électrolytes (K+, Na+), les ions Ca2+ se décollant facilement, provoquant un ramollisme, voire une dissolution du gel. He et al. [4] ont étudié l’immobilisation de la papaïne à l’aide de l’alginate-chitosan de sodium sous deux aspects: premièrement, ils ont utilisé une solution tampon d’acide tris-chlorhydrique lors de la préparation du gel pour réduire le décollement des ions Ca², et maintenir la stabilité du gel; Deuxièmement, ils ont d’abord ajouté de la poudre de chitosan pour améliorer la dureté du gel. Les charges positives (-NH₂) sur le chitosan interagissent avec les groupes carboxyles de l’alginate, stabilisant le gel, le rendant adapté à la charge de colonne. L’activité enzymatique de l’enzyme immobilisée était la même que celle de l’enzyme sans poudre de chitine.

In He et al.' S [4], la valeur optimale du pH pour PA et IPSAC était de 7,2, et l’activité est demeurée stable à des températures inférieures à 70°C. La structure spatiale du PA incorporé n’a pas changé, de sorte que la valeur optimale du pH et la stabilité thermique sont restées essentiellement inchangées. La demi-vie d’ipsac est de 59 jours.

La papaïne immobilisée à l’alginate-chitosan de Sodium (IPSAC) présente une bonne stabilité thermique, une longue demi-vie et une dureté élevée du gel, ce qui la rend appropriée pour la charge de colonne et commode pour la production automatisée dans des environnements industriels.

1.2 méthode d’immobilisation de la papaïne par capsule de Le Chitosan

ChitosanEst un biopolymère obtenu par désacétylation de la chitine, également connu sous le nom de chitine désacétylée. En tant que support enzymatique, le chitosan présente des avantages tels que la stabilité chimique et une bonne stabilité thermique, ce qui en fait un excellent support pour les enzymes immobilisées.

Huang Zeyuan [5] a utilisé du chitosan et de la carboxyméthylcellulose de sodium pour former des capsules d’immobilisation de la papaine, en établissant les conditions optimales d’immobilisation enzymatique comme suit: charge enzymatique de 500 mg/10 mL, concentration de chitosan de 0,2 %, pH de 7,5 et température de 50°C. Le taux de récupération d’activité de la papaïne immobilisée a atteint 69,8%.

2. Méthode d’adsorption

Méthode d’adsorption: la méthode d’immobilisation d’enzymes ou de cellules bactériennes contenant des enzymes en les adsorbant sur la surface d’un adsorbant solide est appelée méthode d’adsorption. Les adsorbants courants comprennent le charbon actif, l’oxyde d’aluminium, la terre diatomée, la céramique poreuse, le verre poreux, le gel de silice et le carboxyphosphate. Le procédé d’adsorption pour la préparation d’enzymes immobilisées est simple à utiliser, présente des conditions légères, ne provoque pas de dénaturation ou d’inactivation d’enzymes, utilise des supports peu coûteux et facilement disponibles, et peut être réutilisé. Cependant, en raison des faibles forces physiques d’adsorption, le complexe enzyme-porteur est instable et enclin à se détacher, ce qui limite son application pratique dans la production industrielle. Les recherches dans ce domaine sont également relativement rares.

2.1 méthode d’adsorption par lyopie pour l’immobilisation de la papaïne dans des matériaux mésoporeux

Il existe différentes méthodes d’assemblageMatériaux fonctionnelsDans les pores des tamis moléculaires mésoporeux, y compris l’adsorption et l’imprégnation en phase gazeuse. Par rapport aux méthodes d’adsorption conventionnelles, la méthode d’adsorption par lyophie-vide est une nouvelle approche avec les avantages suivants: premièrement, elle fournit une force motrice forte, résultant en une adsorption plus élevée des protéines; Deuxièmement, il maintient l’activité enzymatique à basse température.

Gao Bo et al. [6] ont utilisé le matériau mésoporeux SBA-15 comme support pour préparer la papaïne immobilisée. En comparant les caractéristiques des enzymes immobilisées et des enzymes en solution, ils ont constaté que la température optimale de la papaïne augmentait de 60°C à 70°C après immobilisation. La valeur optimale du pH de l’enzyme après immobilisation était de 7,0, sans changement dans la valeur optimale du pH, ce qui peut être attribué aux propriétés de charge superficielle neutre du tamis moléculaire mésoporeux SBA-15. Une certaine quantité d’enzymes immobilisées et d’enzymes en solution ont été prélevées, incubées à 30-90 °C pendant 30 minutes, rapidement refroidi à la température ambiante, puis l’activité enzymatique A été mesurée à 37°C.

Après l’assemblage de la papaïne dans des tamis moléculaires, sa stabilité thermique a été considérablement améliorée. Même après avoir été incubé à 90°C pendant 30 minutes, il a conservé 70% de son activité, alors que l’enzyme en solution avait déjà perdu son activité à 90°C. Cela indique que l’assemblage de l’enzyme dans des tamis moléculaires peut améliorer la stabilité thermique. Étant donné que les températures élevées augmentent non seulement le taux de réaction, réduisent la contamination bactérienne, mais améliorent également la solubilité du substrat, améliorant ainsi le rendement, les enzymes immobilisées préparées en utilisant le matériau mésoporeuse SBA-15 comme support présentent une excellente stabilité thermique, les rendant plus appropriés pour des applications industrielles.

Les résultats expérimentaux indiquent que dans des conditions de vide appropriées, la méthode d’adsorption par lyophilisation peut être utilisée pour préparer des enzymes immobilisées avec une grande efficacité d’assemblage, et l’activité enzymatique reste bonne avec une grande stabilité. Par conséquent, l’adsorption par lyophilisation peut servir de nouvelle méthode d’immobilisation des protéines enzymatiques.

3 méthode de couplage Covalent

Méthode de couplage Covalent: la méthode de préparation d’enzymes immobilisées par liaison covalente de groupes non essentiels en dehors du centre actif de l’enzyme avec des groupes sur le porteur de phase solide est appelée méthode de couplage Covalent, également connue sous le nom de méthode de liaison covalente. La méthode de liaison covalente est l’une des méthodes d’immobilisation les plus activement recherchées actuellement. Ses avantages comprennent une forte liaison entre l’enzyme et le porteur, une résistance au détachement et la capacité à être utilisé en continu pendant de longues périodes.

Cependant, il présente également les inconvénients suivants: (1) au cours du processus d’immobilisation, des collisions directes (rigides) se produisent entre les molécules enzymatiques et les molécules vectrices, ce qui peut altérer l’enzyme.#39; S conformation et provoquer l’inactivation; (2) les vecteurs sont généralement des substances hydrophobes. Lorsque les enzymes sont directement immobilisées sur des porteurs hydrophobes, l’enzyme et#39; le microenvironnement est altéré, entraînant des modifications de la conformation, du pliage ou de la dénaturation de la protéine enzymatique; L’inactivation; (3) la méthode traditionnelle de l’accouplement covalent conduit à des enzymes immobilisées avec une faible liberté de mouvement, et il y a une entrave stérique significative entre les molécules enzymatiques et les substrats, ce qui est défavorable pour maintenir l’activité catalytique homogène de l’état enzymatique libre. Par conséquent, cette méthode est appelée «immobilisation rigide».

Les vecteurs courants pour le couplage covalent comprennent la cellulose, le dextran, l’agarose et la chitine. Nous nous concentrons ici sur plusieurs nouvelles méthodes de couplage covalent pour l’immobilisation de la papaïne.

3.1 immobilisation Flexible de la papaïne à l’aide de l’amidon Bis-Aldose

Pour résoudre les problèmes liés aux méthodes de couplage covalent, les chercheurs ont proposé d’attacher des chaînes courtes (molécules de bras) à la surface du porteur afin de réaliser une «immobilisation à base de bras» des enzymes. Cependant, comme ces chaînes de bras sont des chaînes courtes de faible poids moléculaire et que certaines sont des chaînes de carbone hydrophobes, les molécules enzymatiques subissent encore des forces d’impact importantes pendant l’immobilisation, ce qui entraîne des changements de conformation et une inactivation. Wang Haiping, Wei Rongqing et al. [7-8] ont proposé le modèle de l’ «enzyme immobilisée flexible», qui consiste à fixer des chaînes moléculaires hydrophiles de longueur suffisante au vecteur d’immobilisation, appelées «chaînes flexibles», puis à lier l’enzyme aux chaînes flexibles. Les étapes suivantes ont été utilisées pour réaliser l’immobilisation flexible de la papaïne, comme le montre la Figure 1.

À l’aide du modèle d’immobilisation enzymatique flexible, un support flexible (Chitosan-DAS50) a été préparé à l’aide de chitosan et d’amidon bis-aldéhyde, et la papaïne a été immobilisée avec souplesse. Le taux de récupération d’activité de l’enzyme immobilisée a atteint 72%, soit trois fois celui du support du bras chitosan-glutaraldéhyde (Chitosan-GA). La papaïne immobilisée de manière flexible a conservé la moitié de son activité après 7 à 8 lots eta montré une stabilité de stockage significativement plus élevée que l’enzyme libre.

Les résultats indiquent que la méthode d’ «immobilisation flexible» réduit non seulement l’inactivation enzymatique pendant le processus d’immobilisation, mais garantit également que l’enzyme immobilisée conserve une activité catalytique homogène plus élevée que l’enzyme libre.

3.2 immobilisation de la papaïne sur des microsphères magnétiques polymères

Les microsphères magnétiques polymères sont des poudres ultra-fines contenant des métaux magnétiques ou des oxydes métalliques (tels que le fer, le cobalt, le nickel et leurs oxydes) et présentant une réactivité magnétique. Il s’agit d’un nouveau polymère fonctionnel développé au cours des deux dernières décennies. Par copolymérisation, modification de surface, et d’autres réactions chimiques, divers groupes fonctionnels réactifs (tels que les groupes hydroxyle, carboxyle, aldéhyde, et les groupes aminés) par des réactions chimiques telles que la copolymérisation et la modification de surface. Ces groupes fonctionnels peuvent former des liaisons covalentes avec des substances bioactives telles que des enzymes et des anticorps. Sous l’influence d’un champ magnétique externe, ces microsphères peuvent se déplacer ou se séparer rapidement. Par conséquent, les microsphères polymères magnétiques, en tant que nouveau type de matériau polymère fonctionnel, ont de larges perspectives d’application dans des domaines tels que la biomédicine, la bioingénierie et l’immobilisation enzymatique.

Zeng Lixi et al. [9] ont synthétisé une microsphère composite poreuse à polymère magnétique hautement hydrophile, de taille uniforme et bien dispersée, avec une surface riche en groupes époxydes fonctionnels, qui a été utilisée pourImmobilisation de la papaïne....... En utilisant la caséine comme substrat, les propriétés enzymatiques et les paramètres cinétiques des enzymes immobilisées ont été étudiés. Les résultats ont montré que la température de réaction optimale pour les enzymes immobilisées était de 80°C. Après une incubation à 90°C pendant 40 minutes, les enzymes immobilisées ont conservé 65% de leur activité enzymatique initiale, tandis que les enzymes en solution n’ont conservé que 6,6 % de leur activité enzymatique initiale. Le pH optimal de la réaction était de 7,5. Lorsque le pH variait de 6,0 à 8,5, l’enzyme immobilisée présentait constamment une activité plus élevée que l’enzyme libre, avec un taux de récupération de l’activité enzymatique de 55,2 %. L’enzyme immobilisée a démontré une meilleure tolérance acidobase et une stabilité thermique, une stabilité du pH et une stabilité opérationnelle considérablement améliorées par rapport à l’enzyme libre.

Microsphères composites poreuses polymères magnétiques papaïne immobilisée, ce porteur possède une excellente hydrophicité, biocompatibilité, une grande surface, et une teneur élevée en groupes époxydes fonctionnels, permettant la préparation d’enzymes immobilisées hautement actives et performantes. En utilisant la réactivité magnétique du porteur, l’enzyme peut être facilement séparée du système de réaction sous un champ magnétique externe, ce qui fait une tendance dans l’utilisation de catalyseurs pour les réactions biochimiques.

3.3 chélation métallique immobilisation de la papaïne dirigée par un porteur

La chromatographie d’affinité par chélation métallique (IMAC) utilise la liaison de coordination entre les ligands chélateurs métalliques et les acides aminés électronico-donneurs sur la surface de la protéine, tels que le groupe imidazole de l’histidine et le groupe thiol de la cystéine (l’histidine étant le plus important), pour réaliser la séparation etPurification des protéines....... Les porteurs de chélation métallique ont un impact minimal sur la conformation des protéines immobilisées sur leurs surfaces et peuvent être réutilisés. L’application de cette technique aux enzymes immobilisées est prometteuse pour surmonter certaines des limites des vecteurs et des méthodes d’immobilisation actuellement utilisés.

Liu Linlin etal. [10] ont utilisé des microsphères d’agarose de chélation de métal magnétique comme vecteurs et ont exploité l’interaction entre les ligands de chélation de métal (IDA-Cu² déterminé) et les acides aminés donneurs d’électrons sur la surface de la protéine pour immobiliser directivement la papaïne. Les conditions d’immobilisation optimales étaient: Cu² χ 1,5 × 10^(−2) mol/g de support, temps d’immobilisation de 4 h, pH d’immobilisation de 7,0 et charge enzymatique de 30 mg/g de support. La température de réaction optimale de l’enzyme immobilisée est de 70°C et le pH optimal de la réaction est de 8,0. La stabilité thermique de l’enzyme immobilisée est nettement plus élevée que celle de l’enzyme en solution. La récupération de l’activité enzymatique de l’enzyme immobilisée est de 68,4%, et il présente une bonne stabilité opérationnelle. Après cinq utilisations répétées du porteur, l’activité enzymatique de l’enzyme immobilisée est de 79,71 % de celle de l’enzyme immobilisée initialement.

Les résultats indiquent que lors de l’utilisation de porteurs chélateurs métalliques pour l’immobilisation dirigée de la papaïne, les conditions de réaction à l’immobilisation sont légères, avec un impact minimal sur l’enzyme et#39; S structure d’ordre supérieur et récupération élevée de l’activité enzymatique; La stabilité thermique de l’enzyme immobilisée est considérablement améliorée; Le transporteur a une capacité de charge enzymatique élevée; La régénération du porteur et l’immobilisation de l’enzyme sont simples à utiliser; L’enzyme immobilisée et le transporteur peuvent être réutilisés plusieurs fois, et le coût de production de l’enzyme immobilisée est faible. Par conséquent, cette technologie a de larges perspectives d’application dans l’industrie.

3.4 papaïne Soluble immobilisée

Les enzymes immobilisées préparées par des méthodes traditionnelles présentent des avantages tels qu’une bonne stabilité et une récupération pratique, mais leur application est limitée lorsqu’il s’agit de solutions de substrat insolubles et à haute viscosité, ce qui entraîne une faible efficacité catalytique. La faible efficacité catalytique des enzymes est attribuée à la réaction enzymatique qui se produit dans un système de réaction non homogène entre les phases solide et liquide, ce qui entraîne des probabilités de contact enzyme-substrat significativement plus faibles que les systèmes de réaction enzymatique libres homogènes. Par conséquent, l’amélioration de l’efficacité catalytique des enzymes immobilisées devrait se concentrer sur l’optimisation du système de réaction catalytique et la préparation d’enzymes immobilisées capables de former un système de réaction catalytique homogène.

Li Lingling et al. [11] ont conjugué la papain (PP) avec l’acétate succinate de carboxyméthylcellulose (As-L) pour préparer du PP soluble dans l’eau immobilisé. Les valeurs optimales du pH du PP libre et du PP immobilisé soluble dans l’eau ont été de 6,0 et 5,0, respectivement, avec des températures de réaction optimales de 60°C et 70°C, et des valeurs de Km de 2,53 et 3,07 mg·mL, respectivement. Le PP soluble immobilisé a conservé 62% de son activité après 12 heures d’incubation à 60°C, 62% de son activité est demeurée; À 4°C, après 30 jours, l’activité a conservé plus de 90%; À un pH de 6,0, la stabilité était la meilleure, et elle est demeurée relativement stable dans une plage de pH de 4,0 à 7,0 (activité relative et gt;80%). Le PP Soluble immobilisé peut se dissoudre complètement dans des solutions dont le pH est supérieur à 5,5, avec une plage de pH optimale plus étroite, une température optimale accrue et une valeur de Km plus élevée; La stabilité thermique et acido-basique est considérablement améliorée.

La papaïne immobilisée Soluble combine la haute activité catalytique de la papaïne libre avec la grande stabilité et la facilité de récupération des enzymes immobilisées insolubles, offrant de larges perspectives d’application dans les applications industrielles.

4 méthode de réticulation

Méthode de réticulation: la méthode de réticulation consiste à utiliser des réactifs bifonctionnels pour induire une réticulation entre des molécules d’enzymes ou entre des molécules d’enzymes et des transporteurs en phase solide pour produire des enzymes immobilisées. Les réactifs bifonctionnels couramment utilisés comprennent le glutaraldéhyde, l’hexaméthylènetétramine, l’anhydride maléique et la bis(2-nitro-5-nitrophényl)amine. Parmi ceux-ci, le glutaraldéhyde est le plus largement utilisé. Les Enzymes immobilisées par la méthode de réticulation présentent une forte liaison et peuvent être utilisées pendant de longues périodes. Cependant, en raison de la nature vigoureuse de la réaction de réticulation, de multiples groupes de molécules enzymatiques sont réticulés, ce qui entraîne une perte significative de l’activité enzymatique. Dans les applications pratiques, cette méthode est souvent combinée avec d’autres méthodes d’immobilisation, telles que l’encapsulation de gel suivie d’une réticulation. Cette technique, qui utilise deux ou plusieurs méthodes d’immobilisation, est appelée immobilisation double ou multiple. Cette méthode permet de préparer des enzymes immobilisées à haute activité enzymatique et à bonne résistance mécanique.

La réticulation est la méthode la plus couramment utilisée pour immobiliser la papaïne. La recherche dans ce domaine a commencé très tôt en Chine [12-13], nous n’énumérerons donc que quelques-unes des plus récentes applications de recherche des méthodes de récroisation pour l’immobilisation de la papaïne sur de nouveaux matériaux supports.

4.1 papaïne immobilisée à la soie

Chen Fangyan et al. [14] ont utilisé la fibroine de soie activée comme support et ont utilisé une méthode de réliaison covalente pour immobiliser la papaïne, étudiant les propriétés enzymatiques de la papaïne immobilisée par la fibroine de soie. Les résultats ont indiqué que, étant donné que la fibroine de soie est un polymère hydrophile, la papaïne immobilisée préparée en utilisant la fibroine de soie comme support présentait une affinité considérablement accrue pour le substrat. La constante de Michaelis apparente Km app[caséine] de l’enzyme immobilisée était de 0,092%, soit 0,46 fois celle de l’enzyme en solution (Figure 2); Le pH optimal était de 7,5; À des pH compris entre 6,5 et 8,0, l’activité enzymatique reste stable dans une plage de température de 4,0 à 55°C; La demi-vie opérationnelle de l’enzyme en solution est de 38 jours, celle de l’enzyme immobilisée est de 54 jours. La demi-vie opérationnelle de l’enzyme immobilisée est significativement plus longue que celle de l’enzyme en solution.

4.2 papaïne immobilisée utilisant l’ovalbumine comme support

Huang Yibing et al. [15] ont utilisé l’ovalbuminine dénatée directement comme support, combinée à des méthodes d’immobilisation réticulée traditionnelles, et ont réussi à immobiliser la papaïne en utilisant du glutaraldéhyde comme agent réticulant, simplifiant ainsi les étapes opérationnelles. Des études ont montré que la papaïne immobilisée utilisant l’ovalbumine comme support présente des températures de réaction optimales de 60°C pour l’enzyme native et de 90°C pour l’enzyme immobilisée dans les mêmes conditions de réaction.

La température de réaction optimale de l’enzyme immobilisée a été augmentée. La valeur optimale du pH de la papaïne immobilisée s’est également déplacée vers l’alcalinité à 8,0, et la stabilité acide de la papaïne immobilisée en utilisant la poudre d’ovalbumine comme support a été considérablement améliorée. Après avoir été traitée dans un bain d’eau bouillante à 100°C pendant 5 heures, la papaïne immobilisée a conservé 54,6 % de son activité, tandis que l’enzyme en solution a complètement perdu son activité enzymatique après 2,5 heures de traitement. Les résultats expérimentaux indiquent que la papaïne immobilisée présente une stabilité accrue dans des conditions environnementales. La stabilité est un facteur critique déterminant l’applicabilité pratique des enzymes immobilisées. Dans la plupart des cas, la stabilité enzymatique augmente après l’immobilisation, ce qui est très avantageux.

4.3 papaïne immobilisée au chitosan

Papaïne immobilisée au chitosanEst actuellement une méthode relativement mature pour l’immobilisation de la papaïne [16-18]. La méthode principale consiste à utiliser le chitosan comme support et le glutaraldéhyde comme agent de réticulation pour préparer la papaïne immobilisée [18]. Utilisant le chitosan comme support, le procédé de préparation de la papaïne immobilisée est simple, avec des conditions d’immobilisation légères, et l’enzyme immobilisée qui en résulte présente une résistance à la chaleur et une stabilité thermique considérablement améliorées, ce qui en fait un procédé couramment utilisé pour l’immobilisation de la papaïne.

5 résumé et perspectives

Il existe de nombreuses méthodes pour préparer la papaïne immobilisée. De ces études approfondies, on peut observer qu’après immobilisation, les enzymes subissent certaines modifications de leurs caractéristiques en raison de l’influence des porteurs et d’autres facteurs. Par conséquent, lors de l’application d’enzymes immobilisées, il est essentiel de comprendre les différences de propriétés entre les enzymes immobilisées et les enzymes libres, car cette connaissance est cruciale pour optimiser leur application. En ajustant le processus en conséquence, les enzymes peuvent être actionnés dans des conditions optimales pour catalyser efficacement les réactions. En raison des différences de conception expérimentale entre les chercheurs, il est difficile d’évaluer les avantages et les inconvénients des diverses méthodes d’immobilisation. La papaïne immobilisée préparée selon différentes méthodes a différentes gammes d’application, et la méthode appropriée doit être choisie en fonction des besoins réels pour mieux servir la production.

Après avoir été immobilisée à l’aide de diverses méthodes, la papaïne présente une stabilité accrue, une température optimale accrue, une plus grande marge de tolérance au pH, une activité enzymatique améliorée et une demi-vie prolongée, ce qui indique que la méthode d’immobilisation est appropriée. Il convient de poursuivre l’optimisation pour obtenir de meilleurs résultats. D’après les résultats de la recherche existante, l’amélioration de l’activité et de l’affinité du substrat des enzymes immobilisées est un objectif clé de la recherche future.

En résumant les progrès récents dans l’étude de la papaïne immobilisée, on peut constater qu’avec le progrès continu de la technologie, l’activité catalytique et la stabilité de la papaïne immobilisée sont satisfaisantes. La technologie d’immobilisation enzymatique permet l’utilisation répétée d’enzymes et la séparation efficace des matières premières, des produits et des enzymes, simplifiant ainsi les processus et les équipements de séparation, raccourcissant les cycles de production et réduisant les coûts de production. Les enzymes immobilisées deviendront une forme d’application importante des enzymes dans l’industrie. La maturité croissante de la technologie d’immobilisation enzymatique permettra à la papaïne de jouer un rôle encore plus important dans les aliments, les boissons, les produits pharmaceutiques, les réactifs chimiques, les aliments pour animaux, les textiles et les cosmétiques.

Références:

[1] Jone J G. papaïne raffinée [J]. Process Biochemistry, 1974, 9(6): 21-24.

[2] Xiong Hua. Progrès de la recherche sur l’application de la papaïne [J]. Conservation and Processing, 2006(1): 7-8.

[3] Yao X L, Ku H S, Song W J. étude sur les caractéristiques enzymatiques de l’immobilisation de la trypsine avec différents porteurs [J]. Biotechnology, 2007, 17(3): 71-73.

[4] He Ping, Huang Zhuolie, Li Chuny, et al. Immobilisation et propriétés de la papaïne [J]. Journal of Tropical and Subtropical Botany, 2008, 16(4): 334-338.

[5] Huang Zeyuan. Etude sur l’immobilisation de la papaïne à l’aide de capsules de chitosan [J]. Food Science and Technology, 2002(12): 10-12.

[6] Gao Bo, Zhu Guangshan, Fu Xueqi, et al. Immobilisation de la papaïne dans des matériaux mésoporeux au moyen de l’adsorption sous vide [J]. Journal of Jilin University, 2005, 43(6): 66-71.

[7] Wang Haiping, Wei Rongqing, Shen Bin, et al. Etude sur l’immobilisation Flexible de la papaïne à l’aide de l’amidon Bis-Aldose [J]. Bioprocess Engineering, 2004, 2(1): 25-29.

[8] Wei Rongqing, Shen Bin, Liu Xiaoning, et al. Immobilisation Flexible de la papaïne en utilisant un support de Chitosan [J]. Journal of Process Engineering, 2005, 5(2): 183-187.

[9] Zeng Lixi. Etude de l’activité et de la stabilité de la papaïne immobilisée sur de nouvelles microsphères poreuses à polymère magnétique [J]. Journal of Natural Sciences, Hunan Normal University, 2007, 30(1): 101-106.

[10] Liu Linlin, Zeng Lixi, Liu Ting, et al. Etude sur l’immobilisation dirigée de la papaïne sur des porteurs de chélates métalliques [J]. Journal of Bioengineering, 2005, 20(5): 26-31.

[11] Li Lingling, Zhang Tao, Yu Rong et al. Préparation et propriétés de la papaïne immobilisée soluble [J]. Journal of West China Pharmacy, 2007, 22(2): 77-79.

[12] Tao Guoliang, Li Yanfeng. Etude sur l’immobilisation de la papaïne sur le chlorure de polyvinyle sphérique macroporeux traité à l’ammoniac [J]. Applied Chemistry, 1993, 10(2): 9-12.

[13] Tan Huiying, Chen Xuelin. Immobilisation et Activation infrarouge de la papaïne sur des microbilles [J]. Biotechnology, 1993, 3(5): 17-20.

[14] Chen Fangyan, Ji Pingxiong. Etude des caractéristiques de la papaïne fixée à la soie [J]. Journal of South China Agricultural University, 2005, 26(4): 81-83.

[15] Huang Yibing, Wu Xiaoxia, Wu Shengnan et al. Etude sur l’immobilisation de la papaïne en utilisant l’ovalbumine comme support [J]. Journal of Jilin University, 2004, 42(4): 15-20.

[16] Huang Jianshao, Zhang Hong. Papaïne immobilisée au chitosan [J]. Journal of Changde Normal University (édition des sciences naturelles), 2002, 14(1): 36-39.

[17] Yuan Chuntao, Jiang Xianming. Étude sur la papaïne immobilisée au chitosan-g-acrylonitrile-[J]. Applied Chemistry, 2002, 19(9): 28-31.

[18] Liao Qiu Hua. Etude sur l’immobilisation de la papaïne par le Chitosan microcristallin [J]. Journal du collège médical militaire de Guangzhou, 1998, 21(1): 30-32.