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japonaisComment synthétiser l’extrait de Ginkgo acide ginkgolique?
Ginkgo bilobA aL....... est la plus ancienne espèce d’arbres vivants sur la planète Et etest connu comme le «fossile vivant d’or». Gymnosperme économique uniqueen Chine, il a de multiples valeurs comme nourriture (fruits blancs), médecine (feuilles et fruits blancs) et plantes ornementales. Les noix de Ginkgo (graines) sont un célèbre fruit séché favorisant la santé en Chine. En tant qu’aliment aux propriétés médicinales à haute valeur nutritionnelle, les ginkgolides qu’il contient sont des ingrédients actifs potentiels contre le virus 2019-nCoV [1].Les feuilles de Ginkgo biloba sont riches en flavonoïdes et en lactones.L’extraction de Ginkgo biloba (EGB) avec de l’acétone d’eau comme agent d’extraction peut enrichir davantage les deux substances actives pour traiter efficacement les maladies cardiovasculaires et cérébrovasculaires [2]. Ginkgo biloba est un arbre d’ornement de renommée mondiale pour l’aménagement paysager avec sa forme de feuille unique, couleur de feuille d’or et la forme d’arbre droit. À l’heure actuelle, le ginkgo a été largement développé dans les industries pharmaceutique, alimentaire, cosmétique, bonsaï et du bois, et est l’une des espèces d’arbres économiques clés pour la revitalisation actuelle et future de l’économie rurale et la construction d’une belle Chine.
Depuis les années 1970, la Chine et#39; S ressources de ginkgo ont connu une croissance rapide, et les ressources existantes représentent plus de 80% du monde' S total.Les Ginkgo sont distribués dans toutes les provinces(y compris ceux introduits d’autres endroits), à l’exception du Hainan, du Heilongjiang et de la Mongolie intérieure. Actuellement, la superficie cultivée de ginkgo en Chine est de plus de 333.300 hm2, avec une production annuelle d’environ 11.000 tonnes de noix de ginkgo et 10.000 tonnes de feuilles vertes séchées. La valeur de production annuelle de l’industrie primaire de la culture du ginkgo est d’environ 2 milliards de yuans, et l’industrie secondaire de la transformation du ginkgo et de la production pharmaceutique (médecine des feuilles de ginkgo) vaut plus de 10 milliards de yuans.
Cependant, environ 30 000 tonnes de couches extérieures sont rejetées chaque année en raison de la production. Zhang Xinhui et al. [3] ont montré que l’enveloppe extérieure de la graine contient des substances actives telles queAcide ginkgolique, flavonoïdes, lactones terpéniques et polysaccharides.Itokawa et al. [4] ont montré que l’acide ginkgolique est une autre substance actifimportante dans le ginkgo biloba, en plus du ginkgolide et de la ginkgoflavone. Il a des effets bactéricides, bactériostatiques, anti-inflammatoires, antiviraux, insectifuges et insecticides, et est d’une grande valeur pour le développement. Par conséquent, la grande quantité de couches de graines extérieures jetées pollue non seulement l’environnement, mais provoque également un gaspillage de ressources.
Dans les années 1970, Gellerman et al. [5-7] ont détecté laAcide phénolique ginkgolide de feuilles de ginkgo, graines immatures et manteaux de graines externes matures. Des mesures quantitatives ultérieures ont montré que le ginkgolide est concentré dans les couches extérieures matures de graines. Wang Jie et al. [8] et Li Hongqing et al. [9] ont utilisé la spectrométrie de masse pour identifier quatre acides ginkgoliques et deux ginkgolides provenant d’extraits acides de ginkgo. La recherche médicale moderne a prouvé que les ginkgolides ont une certaine toxicité allergénique et cytotoxicité, peuvent résister à la croissance de bactéries et de champignons, et ont pour effet de tuer les ravageurs.
Des expériences de culture sur le terradansont prouvé que ginkgolidesPeuvent être développés en tant que biopesticides, et ils peuvent être utilisés dans un large éventail de domaines tels que la médecine et les cosmétiques à l’avenir. Cependant, par rapport à des substances ayant des activités pharmacologiques claires telles que les flavonoïdes du ginkgo et les lactones terpènes, la voie de biosynthèse, le mécanisme de régulation et l’efficacité dérivée de l’acide ginkgolique n’ont pas été étudiés en profondeur, ce qui a ralenti la recherche et le développement de techniques de biologie moléculaire pour inhiber la synthèse de l’acide ginkgolique et l’application technique de la fermentation pour produire des rendements élevés de l’acide ginkgolique. Entravant ainsi le développement de l’industrie du ginkgo.
Dans ce contexte, l’auteur résume les recherches fondamentales sur laActivité biologique des ginkgolidesCes dernières années, détaille la voie de synthèse des ginkgolides, qui est composé de synthèse d’acides gras et de synthèse de polykétide, résume le mécanisme catalytique des enzymes clés impliquées dans la synthèse, et envisage la direction future de la recherche, dans le but de fournir une référence et un soutien théorique pour la recherche ultérieure sur les ginkgolides.
1 activité biologique des ginkgolides
L’acide Ginkgolide appartient à la famille des lipides phénoliques, qui a quatre catégories principales: les alkylphénols, les alkylrésorcinols, les acides anacardiques et les alkylcatéchols [10]. Il s’agit d’une classe de métabolites secondaires chez les plantes. Différentes espèces de plantes peuvent contenir des substances phénoliques uniques. Leur fonction physiologique principale est de résister aux stress biotiques et abiotiques.
1.1 composition du Ginkgolide et propriétés physiques et chimiques
Les Ginkgolides sont d’importants métabolites secondaires du ginkgo biloba, et appartiennent à la classe des laques. Ils comprennent trois composants: l’acide ginkgolique, le ginkgol et le bilobol [11] [traduction]. L’acide ginkgolique est un acide 2-hydroxy-6-alkényl (alkynyl) benzoïque (figure 1a) avec une longueur de chaîne latérale de 13, 15 ou 17 et un nombre de liaison double de chaîne latérale de 0 à 2. Au total, cinq types ont été isolés et identifiés, à savoir l’acide ginkgolique B, l’acide ginkgolique A, l’acide ginkgolique, l’acide heptadec-1-enylginkgolique et l’acide heptadec-1-dienylginkgolique. Les Ginkgolides sont des 3-alkenylphénols ayant une longueur de chaîne latérale de 15 ou 17 et un nombre de liaison double de chaîne latérale de 1, et il existe deux types au total; Les acides ginkgoliques sont des 5-alkenylrésorcinols ayant une longueur de chaîne latérale de 15 ou 17 et un nombre de liaison double de chaîne latérale de 2 (figure 1b), et il existe deux types au total.
Des plantes comme le géranium (Pelargonium hortorum) de la famille des géraniacées [12] [en] et le sumac (Anacardium occidentale) de la famille des anacardiacées [13] contiennent également des acides urushioliques. Les longueurs de chaîne côté alkyl/alkenyl et le nombre de liaisons insaturées, et ainsi de suite, mais la structure chimique est similaire à celle des ginkgolides. Les acides ginkgoliques sont lesSubstances principales dans l’extrait de ginkgolides, représentant 90% de l’extrait acide entier. Les proportions des cinq acides ginkgoliques sont différentes, principalement l’acide ginkgolique (teneur de 50%), suivi de l’acide ginkgolique heptadec-1-enyl (22%) et de l’acide ginkgolique (20%) [14] (Figure 2). Avec le développement de la science et de la technologie, l’acide ginkgo a été détecté dans les feuilles de ginkgo, les couches de graines et les grains. La teneur totale en acide de ginkgo des feuilles de ginkgo de différentes variétés (souches) est d’environ 14,5765-23,6813 mg/g [15], et la teneur totale en acide de ginkgo des grains matures est d’environ 0,11 mg/g [14]. Et la teneur totale en acide ginkgolique dans l’enveloppe extérieure de la graine peut atteindre 28,78 mg/g [16].
Le point de fusion de l’acide ginkgolique est de 41-42°C. À température ambiante,L’acide ginkgolique pur a un aspect huileux ou poudré, et est peu soluble dans les solvants polaires tels que l’eau ou l’éthanol, mais facilement soluble dans les solvants non polaires tels que l’éther de pétrole léger. Il précipite sous forme de cristaux dans un solvant saturé d’éther de pétrole [17]. En solution, les groupes hydroxyle et carboxyle de l’anneau benzène de l’acide phénolique s’ionisent pour produire un acide faible, qui peut subir des réactions d’estérification et de saponification. L’acide ginkgolique qui a subi une estérification ou une saponification est plus facile à extraire et à séparer, ce qui permet d’obtenir l’effet de purification. Le point de fusion de l’acide ginkgolique est d’environ 136 °C et le point d’ébullition est d’environ 500 °C. A 200 °C, le groupe carboxyle de l’anneau phénolique acide benzène subit une réaction de décarboxylation pour libérer du CO2, qui peut être séparé par la méthode du gradient de température. Par conséquent, selon la recherche sur les propriétés physiques et chimiques, dans le traitement des produits à base de ginkgo, des méthodes telles que «la cuisson à l’air chaud», «l’extraction par ultrasons de l’acide phénolique de ginkgo avec adsorption de résine» et «la compatibilité des herbes médicinales chinoises» sont souvent utilisées pour éliminer les acides phénoliques pour atteindre le but de la désintoxication. Chen et al. [18] les derniers résultats de recherche montrent que la laccase immobilisation sur un nouveau Type de produitde feutre de nanofibres électrofilées peut catalyser la dégradation de l’acide phénolique de ginkgo. Cependant, les méthodes susmentionnées de traitement à l’acide dephénolique présentent des inconvénients tels que le coût élevé et la difficulté de fonctionnement, et ne conviennent pas à la désintoxication à grande échelle.
1.2 activité biologique des ginkgolides
Ginkgolides ont antibactérien, insecticide,Effets allergènes, cytotoxiques et anticancéreux. Leurs diverses activités biologiques peuvent être exploitées dans la production agricole, la santé et d’autres domaines.
1.2.1 effet antibactérien
L’acide de Ginkgo est l’acide 6-alkylsalicylique, qui a une large gamme de propriétés antibactériennes. Il a un effet inhibiteur sur Bacillus subtilis, Escherichia coli, Staphylococcus aureus, Shigella dysenteriae, Pseudomonas aeruginosa, et une variété de bactéries gram-négatives et gram-positives [19-20]. Son extractif acide a un effet inhibiteur sur le champignon du mildiou de la gaine de riz, le champignon du flétrissement de la tomate, le champignon de l’anthracnose de la pomme, le champignon des taches des feuilles de maïs et le champignon de la moisissure rouge, et son effet antibactérien est comparable à celui de certains médicaments antifongiques [21]. Xu Lichun et al. [22] ont montré que 0,1% d’acide ginkgoïque (15:1) avait un taux d’efficacité de 92% dans l’inhibition des champignons, tandis que 0,5% de clotrimazole avait seulement 68% d’efficacité. Muroi et al. [23] ont montré que l’acide ginkgoïque avait un effet synergique avec les médicaments antibactériens standard pour détruire Staphylococcus aureus résistant à la méthicilline, et l’activité bactéricide de l’association était au moins 100 fois plus élevée que celle du médicament unique dans les 48 heures.
1.2.2 effet insecticide
Il a été démontré que l’acide de Ginkgolide a un effet tueur significatif sur les pucerons, des larves, des papillons de chou, des araignées, des tiques de mûrier, des foreurs de riz et d’autres insectes à mâcher [20]. Dans un essai de contrôle des pucerons, Shi Qitian [24] a constaté que l’effet tueur de l’extrait acide de ginkgolide était comparable à celui du pesticide imidaclopride. Deng Yecheng et al. [25] ont utilisé différentes polarités d’extraits d’exocarpes dans des essais de toxicité par contact et ont constaté qu’ils avaient un fort effet tueur sur les larves de planthoppes brunes, de pucerons de pêche, d’araignée rouge et de papillons de chou.
1.2.3 effets allergiques
En 1934, Hill et al. [26] ont signalé qu’une substance active dans le ginkgo a un fort effet érosif sur la peau. En 1969, Gellermen isolait les acides phénoliques laqués des noix de noix de coco et des graines de ginkgo, respectivement, et soulignait qu’ils avaient un fort effet sensibilisant sur la peau [5]. Cheng Liang et al. [27] [traduction] ont signalé que l’acide ginkgolique (C15:1) est métabolisé en ginkgolide, qui est ensuite oxydé pour former du catéchol, provoquant une réaction allergique. Vincieri et al. [28] ont montré que l’acide ginkgolique peut inhiber l’activité de diverses déshydrogénases dans le métabolisme du glucose. Ahlemeyer et coll. [29] ont conclu queL’acide de ginkgo a un effet inhibiteur concurrentielSur la glycérol-3-phosphate déshydrogénase. Certains chercheurs supposent que l’acide ginkgolique a une nature bipolaire (hydrophile et lipophile) et peut inhiber l’activité des enzymes liées au corps ou aux organes, affectant ainsi le métabolisme et provoquant des allergies [30] [en].
1.2.4 cytotoxicité
Le Ginkgolide a des groupes hydrophiles et lipophiles, qui peut se lier à la membrane cellulaire à travers la membrane et causer la mort cellulaire. Al-Yahya et al. [31] ont utilisé de l’extrait de ginkgo contenant de l’acide ginkgo pour effectuer un essai de toxicité sur des rats mâles, et les résultats ont montré que l’extrait peut causer la perte de chromosomes tels que les cellules germinales, affectant la fonction reproductive normale des rats. Ahlemeyer et al. [29] ont constaté que l’acide ginkgolide présente une neurotoxicité et peut entraîner la mort de cellules neuroblastomiques de poulet. Ces dernières années, des chercheurs ont mené des études distinctes sur la toxicité de divers acides ginkgo. Jiang et al. [32] ont constaté que l’acide de ginkgo (C15:1) peut causer un stress oxydatif et endommager les cellules du foie des rats en induisant des troubles métaboliques de la purine. Yao et al. [33] ont constaté que la toxicité de l’acide heptadécylidène ginkgo (C17:1) pour les cellules HepG2 est directement proportionnelle au temps et à la dose, eta augmenté la cytotoxicité en mediant le métabolisme du CYP1A et du CYP3A. Des études ont montré que parmi les ginkgolides, l’acide ginkgolique (C13:0), l’acide ginkgolique (C15:1) et l’acide ginkgo heptadécylidène (C17:1) sont plus toxiques, et d’autres acides phénoliques peuvent agir en combinaison avec les trois acides ginkgo pour augmenter la cytotoxicité.
1.2.5 effet anticancéreux
Les Ginkgolides ont une cytotoxicité et peuvent jouer un rôle anticancéreux....... Qiao et al. [34] ont constaté que l’acide de ginkgo peut induir l’activation de la protéine kinase activée par le monophosphate-adénosine (AMPK) pour inhiber la prolifération et la migration. Liang et al. [35] ont constaté que l’acide de ginkgo peut inhiber la croissance des cellules cancéreuses gastriques en inhibant la voie de signalisation STAT3/JAK2 régulée par ros. Liu et al. [36] ont montré que l’acide de ginkgo peut bloquer la transition des cellules cancéreuses du côlon de la phase G0/G1 de division cellulaire, conduisant à la mort des cellules cancéreuses. Des expériences cellulaires dansvitro ont montré que l’acide de ginkgo peut inhiber la prolifération et la migration des cellules cancéreuses et activer des enzymes connexes pour favoriser l’apoptose. Et peut devenir un médicament adjuvant anticancéreux pour le traitement de la tumeur à l’avenir.
2 biosynthèse Ginkgolide
Dans les années 1970, Gellerman de l’université du Minnesota aux États-Unis a utilisé la méthode d’étiquetage 14C pour effectuer unExploration préliminaire de l’acide ginkgolideVoie de synthèse. Dans les années 1990, Walters et al. [37] ont utilisé la chromatographie gaz-liquide (piégeage GLC) pour analyser les esters monométhyle étiquetés extraits de la chromatographie liquide (CLHP), et ont déterminé les étapes synthétiques spécifiques de la Urushiol (acide 2-hydroxy-6-alk(en) yl-benzoïque) dans le géranium. Singhal [38] et Narnoliya et al. [39] ont étudié plus en détail les types et les fonctions des enzymes clés dans la synthèse de Urushiol.
2.1 voie de biosynthèse du Ginkgolide
Gellerman et al. [6-7] croient que le cercle aromatique et le groupe alkyl/ alkényle à longue chaîne du ginkgolide sont synthétisés par étapes, selon l’infence expérimentale, il est divisé en trois parties: ① malonyl-CoA et acétyl-coa forment le palmitoyl-CoA libre et l’oléoyl-coa par la synthèse des acides gras; ② acyl-CoA à longue chaîne est synthétisé pour former de l’acide ginkgolique par synthèse de polykétide; ③ l’acide ginkgolique perd le groupe carboxyle de l’anneau benzène et est oxydé et réduit àSubstances telles que le ginkgol.
Le géranium (Pelargonium hortorum) est une plante de la famille des geraniacées. Ses trichomes ne sécrètent que de l’acide shikimique (homologue de l’acide ginkgoïque), ce qui en fait la meilleure espèce pour étudier la voie de synthèse de l’acide shikimique. Le géranium de Type de produitsauvage sécrète de l’acide shikimique avec une chaîne latérale saturée, tandis que les types résistants aux insectes sécrètent de l’acide shikimique avec une chaîne latérale monoinsaturée (C15:1 et C17:1). Des études ont montré que l’acide urushiol insaturé dans les géraniums est identique dans la structure moléculaire aux deux acides ginkgoliques (acide ginkgolique (C15:1) et acide ginkgolique (C17:1)) sauf pour la différence dans la position de la double liaison. Hesk et al. [12] ont comparé les gènes différentiels et les métabolites des géraniums de type sauvage et résistants aux insectes, et ont révélé le mécanisme moléculaire de la synthèse de l’urushiol. Les chercheurs ont utilisé la technologie RNA-seq pour construire une base de données sur les transcriptomes de l’adnc du géanium, et ont identifié les gènes clés de la synthèse comme étant le gène Polyketide Synthases emon et le gène Stearyl-ACP Desaturase (SAD) au moyen d’une comparaison par annotation génétique et d’une analyse de l’Expression:différentielle. La voie réglementaire deSynthèse de ginkgolideEst expliqué en utilisant l’acide ginkgolique (15:1) et l’acide heptadécylideneginkgolique (17:1) comme exemples.
2.1.1 synthèse de la chaîne latérale alkylée
Le conseil des ministresLa synthèse des ginkgolides est d’abord basée sur la synthèse de l’acide palmitoléiqueLa fermentation du saccharose stocké en phosphoénolpyruvate, le changement allostérique de la pyruvate kinase (pyruvate kinase) pour former la pyruvate du cytoplasme dans le plastide, et la catalyse de la pyruvate déshydrogénase (PDH) pour former l’acétyl-coa constituent la molécule 2C de départ pour les acides gras. L’acétyl-coa est catalysé par l’acétyl-coa carboxylase (ace-tyl-coa carboxylase, ACC) pour former la malonyl-CoA. La Transacylase (TA) remplace la molécule de CoA par une protéine porteuse d’acyle (ACP) pour former la malonyl-ACP. La Malonyl-ACP perd son groupe carboxyle pour devenir acétyl-acp et est condensée dans un cycle par la β-kétoacyl-acp synthase III. Le droit de la famille(KAS III) pour former le matériau de départ 4C acyl-ACP.
4C acyl-ACP est condensé à plusieurs reprises par β-Ketoacyl-ACP synthase I (KAS I) pour former palmitoyl-ACP (C16:0 ACP), qui est ensuite déshydrogénée par δ9-stéaroyl-acp désaturase (SAD) pour former palmitoléic-acp (δ9 C16:1 ACP). Le SAD) est déshydrogéné en acide palmitoléique ACP (δ9 C16:1 ACP), puis catalysé par la kétoacylsynthase II (β-kétoacyl-acp synthase, lcpe, KAS, lcpe) pour former l’acide oléique ACP (δ11 C18:1 ACP). La Palmitoyl-ACP et l’oléoyl-acp dans les plastides sont respectivement déacylées par la thioestérase A (TE/FatA) et la thioestérase B (TE/FatB) pour former des acides gras libres et insaturés [40] [traduction]. Enfin, les acides gras libres sont convertis en palmitoleyl-CoA (δ9 C16:1CoA) et en oléoyl-coa (δ11 C18:1CoA) par l’acyl-coa synthase (ACS) dans la membrane externe du plastide, puis transférés au cytoplasme pour devenir les deux précurseurs importants des acides ginkgoliques.
Cependant, laVoies de synthèse des acides gras de l’acide ginkgoliqueEt geranylgeranyl sont différents. Les précurseurs de la synthèse de l’acide ginkgolique (C15:1) et de l’acide heptadécylideninkolique (C17:1) sont l’acide palmitoléique (δ9 C16:1) et l’acide oléique (δ11 C18:1), tandis que les précurseurs de la synthèse des 2 chaînes côté monoényle de l’acide oléique sont l’acide palmitoléique (δ11 C16:1) et l’acide oléique (δ13 C18:1). Les acides gras ω-7 communs (acide palmitoléique (δ9 C16 1:1) et acide oléique (δ11 C18 1:1)) peuvent être formés dans de nombreuses plantes sauvages et algues à partir de palmitoyl-ACP (C16 1:0 ACP) par désaturation, polycétone et autres réactions. Schultz et al. [41] ont découvert qu’un nouveau type de désaturase de l’acp du géranyle dans le géranium déshydrogénise l’acide myristique (δ9 C14:1) pour former de l’acide myristique (δ9 C14:1), puis subit des réactions de polycétide et d’autres pour former deux acides gras mono-insaturés (acide palmitoléique (δ11 C16:1) et acide oléique (δ13 C18:1)). Par conséquent, la voie synthétique des acides gras précurseurs de l’acide ginkgolique est plus facile à explorer que celle de l’acide pélargonolique dans les géraniums.
Singhal [38] a identifié et vérifié l’expression de gènes liés à la synthèse d’acides gras mono-insaturés (acide palmitoléique et acide oléique) dans le géranium. Les résultats ont montré que lorsque l’expression génétique des protéines porteuses de l’acyle (pca), des Les synthaseskétoacyle (KASs) et des thioestérases (TEs) dans les tissus était élevée, la teneur en acides gras et en acide ursolique était également élevée. La protéine porteuse d’acyle (ACP) est un support intermédiaire conservé qui est essentiel au processus de synthèse des acides gras. Il travaille avec la désaturase acyl-ACP (AAD) pour désaturer la chaîne acyle, en modifiant le rapport des acides gras saturés et insaturés. Il peut également agir comme une enzyme limitant le taux avec ketoacyl-ACP synthase (KAS) pour réguler le taux de synthèse de l’acide phénolique.
2.1.2 synthèse des anneaux du phytylbenzène
La synthèse du cycle du phytylbenzène est une étape clé dans la formation d’acides phénoliques à partir d’acides gras plus élevés. La voie de synthèse est représentée à la Figure 4. En prenant l’acide gammacérolique (C15:1) à titre d’exemple, le palmitoyl (δ9 C16:1) de la voie des acides gras utilise la malonyl-CoA comme substrat et sous l’action du polykétide Syn- thase emon (PKS emon), quatre atomes de carbone sont ajoutés à l’extrémité acyle par une réaction de condensation en deux étapes; Deuxièmement, le groupe cétone à la position C3 est réduit par la cétone réductase (PKS- ketoacyl-CoA réductase, KR) pour former un groupe hydroxyle, et une double liaison est formée par la déshydratase (pks-déshydratase, DH) retire une molécule d’eau pour former une double liaison; Troisièmement, après condensation et polymérisation, deux atomes de carbone supplémentaires sont ajoutés à l’extrémité acyle. A ce moment, l’ion hydrogène en position C2 se rapprochera du groupe cétone en position C7 pour maintenir la stabilité de la structure intermédiaire du tripeptide 4,15-diène; Quatrièmement, en s’assurant que le groupe cétone à C1 ne décarboxylate pas, le cyclase (PKS-Cyclase) catalyse la cyclisation de l’ion hydrogène à C2 avec le groupe cétone à C7, semblable à une condensation aldol, et une double liaison est formée sous l’action de la déshydratase (pks-déshydratase); Cinquièmement, l’énoyle réductase (pks-énoyle réductase, ER) catalyse la formation d’une double liaison et l’aromatisation du groupe cétone sur l’anneau de carbone hexagonal. Il et le groupe carboxyle C1 forment ensemble la structure de l’acide benzoïque; Enfin, la chaîne latérale monoinsaturée est formée pour produire de l’acide ursolique (C15:1) [37,39].
La polykétide synthase (PKS III) de type III. Le droit de la familleest l’enzyme limitant le taux pour la synthèse des lipides phénoliques (alkylphénols, alkylrésino-cyls, urushiols, alkylcatéchols, etc.) [42]. La Chalcone synthase (CHS) et la stilbène synthase (STS) sont deux des superfamilles les plus représentatives. STS) sont deux des superfamilles les plus représentatives. Ils peuvent catalyser la condensation et la cyclisation des chaînes d’acyle aux positions C1 et C6 (condensation de Claisen) et aux positions C2 et C7 (condensation d’aldol), respectivement, pour former des substances phénoliques. Cependant, les acides uroniques peuvent catalyser la condensation de l’ion hydrogène en position C2 avec le groupe cétone en position C7 tout en conservant le groupe carboxyle en position C1 pour former de l’acide benzoïque. Cette réaction de cyclisationdu polykétide qui retient le groupe carboxyle du cycle benzène est relativement rare chez les plantes. Par conséquent, des recherches plus poussées sur la polykétide synthase de type III (PKS III), la cyclase (PKS-Cyclase) et la kétoacylréductase (pks-kétoacyl-coa réductase, KR) peuvent également révéler laMécanisme de synthèse de l’acide ginkgolique, et la teneur en acides phénoliques dans les tissus de ginkgo peut être contrôlée en combinant des méthodes physiques et chimiques ou biotechnologiques.
2.2 gènes d’enzymes clés pour la synthèse de l’acide phénolique
A l’heure actuelle, les principaux rapports sur la recherche de gènes d’enzymes clés pour la synthèse de l’acide phénolique proviennent de l’urushiol, tandis qu’il existePeu de rapports sur les ginkgolides....... La voie de synthèse de l’acide phénolique est divisée en 2 parties: la synthèse des acides gras et la synthèse des anneaux aromatiques. Parmi celles-ci, la protéine porteuse d’acyle (ACP), la stéaroyle désaturase (SAD), la KASs (KASs), la polykétide synthase de type III (PKS III) et la cyclase (PKS-Cyclase) sont des enzymes clés qui déterminent le taux et le rapport de contenu de la synthèse de l’urushiol.
2.2.1 protéine porteuse d’acyle (ACP)
La protéine porteuse d’acyle (ACP) appartient à la grande famille des protéines porteuses. En tant que protéine mélangée, elle peut s’associer à divers complexes protéine-enzyme pour transférer des chaînes d’acyle d’un Site internetde centre enzymatique à un autre. Il agit également comme cofacteur pour la stéaroyl-acp désaturase (SAD) et acyl-ACP hydrolase (AAH), et joue un rôle important dans les voies de la synthèse des acides gras (FAS) et de la synthèse des polyketide (PKS).
Li Mengjun et al. [43] [traduction] ont analysé la structure des gènes de la protéine porteuse de l’acyl chez 17 espèces, dont Arabidopsis thaliana, Clycine max, Oryza À propos de sativaet Zea mays, et les ont classées en cinq catégories. Parmi eux, la famille de gènes ACP de type plasmidique (la région codante se compose de 4 exons et 3 introns) et la famille de gènes ACP de type mitochondrial (la région codante se compose de 2 exons et 1 intron) représentent la plus grande proportion de l’ensemble. Ils ont tous deux un site serine très conservé qui peut se lier au 4' -phosphopantéthéine adduct cofactor group, et activer le holo-ACP pour fonctionner. La structure tertiaire de la famille des protéines ACP est généralement cohérente et se compose de quatre hélices α conservées. Trois des hélices α (I, II, IV) sont parallèles, tandis que l’hélice α (III) est perpendiculaire au centre de l’hélice, formant une cavité structurale hydrophobe fournissant une structure hydrophobe protectrice pour diverses chaînes d’acyle [44].
L’hélice α, que l’on appelle l’hélice de reconnaissance, peut interagir avec la synthase ketoacyl-ACP, que l’on appelle la synthase β-Ketoacyl-ACP, que l’on appelle l’hélice de reconnaissance. Singhal [38] a réalisé le séquençage des transcriptomes sur les geraniums et éliminé deux séquences complètes d’adnc de protéine ACP (Pxh1 et Pxh2) liées à la synthèse de l’acide urushiol. La vérification de l’expression génétique et l’analyse phylogénétique ont montré que les gènes Pxh1 et Pxh2 étaient fortement exprimés dans le tissu trichome du geranium, et sont très homologues au gène de biosynthèse de la protéine ACP de l’acide 14-carbone-1-ène (δ9 C14:1) de la coriandre (Coriandrum sativum), qui catalyse la désaturation des acides gras dans la voie de l’acide uronique.
2.2.2 Ketoacyl-ACP synthase (KASs)
Sous l’action du complexe des acides gras synthases (FAS), la malonyl-ACP est utilisée comme substrat pour former lePrécurseurs de l’acide ginkgolique, l’acide palmitoléique (δ9 C16:1) et l’acide oléique (δ11 C18:1), à travers de multiples cycles de condensation. Le complexe des acides gras synthases est composé de trois synthases kétoacyl-acp (KASs), qui appartiennent à la superfamille des enzymes cond. Ce sont toutes des lipoprotéines hydrophobes contenant le domaine structurel conservé par KAS et aucun peptide signal. KAS III catalyse la polymérisation de la malonyl-CoA et de l’acétyl-coa pour former la chaîne acyle initiale (3-kétobutyryl-acp); KAS I catalyse la polymérisation de la chaîne d’acyle et de malonyl-ACP pour former des acides gras avec 6C-16C; Et KAS II catalyse la condensation de malonyl-ACP et de l’acide palmitique pour former des acides gras 18C.
Chez des plantes telles que perilla [45] et le coton des hautes terres [46], KAS II est une protéine non sécrétée légèrement acide ayant une longueur d’acide aminé d’environ 500 aa. Il détermine le rapport des acides gras C16:C18 et peut réguler la résistance au froid des plantes. Les chercheurs ont obtenu sept gènes ketoacyl-ACP synthase (KASs) à partir du transcriptome de Pelargonium xanthium, dont PxKAS
2.2.3 stéaroyl-désaturase acp (SAD)
La désaturase de stéaroyl-acp (SAD) est la seule famille connue de désaturases solubles dans les plantes, qui régule le rapport entre les acides gras saturés et insaturés. Parmi eux, la dénaturase δ9 stéaroyl-acp est la plus largement étudiée dans les plantes. Il catalyse la déshydrogénation des positions C9 et C10 de la chaîne d’acyle pour former la première double liaison. La protéine SAD est un homodimère composé d’un domaine conservé appartenant à la famille des désaturases acyl-ACP et d’un domaine conservé appartenant à la famille des ferritines. Les quatre hélices α dans la région conservée triste forment une structure de faisceau de quatre hélices, qui cache un centre catalytique symétrique de faisceau de deux ferres de Fe-O-Fe. Ensemble, ils forment le centre actif de l’enzyme pour la déshydrogénation de la chaîne d’acyle [47]. La structure cristalline des protéines montre que l’enzyme SAD a une rainure profonde s’étendant de la surface moléculaire à l’intérieur, qui peut accueillir la chaîne d’acyle 18C et se lier au centre ferreux au fond de la rainure pour subir des réactions redox. Cette structure à rainure peut également permettre aux chaînes d’acyle 16C et 14C de réagir, mais le taux de renouvellement catalytique est faible [48].
Schultz et al. [41] ont projeté une nouvelle dénaturase acyl-ACP provenant d’une bibliothèque adnc de géranium. L’alignement des séquences génétiques a révélé un degré élevé d’homologie avec le gène de dénaturase (SAD) de stéaroyl-acp de la féverole de ricin. Les résultats de la transformation génétique et de la vérification à l’aide d’escherichia coli (E. coli) ont montré que le nouveau gène peut catalyser la déshydrogénation de l’acide myristique-acp (C14:0) pour former l’acide myristique-acp (δ9 C14:1), de sorte qu’il est appelé gène de désaturase de l’acide myristique-acp (MAD, δ9 14:0-ACP desaturase). La détection de l’expression génétique singhale [38] et la validation de la transformation génétique du tabac (Nicotiana tabacum) montrent que le tétradécyl-acp (δ9 C14:1), le produit catalysé par l’acide myristique - acp désaturase (MAD), est un précurseur clé de palmitoléique acp (δ11 C16:1) et oléique acp (δ13 C18:1). L’activité de la désaturase de myristoyl-ACP (MAD, δ9 14 2:0 - ACP désaturase) détermine la teneur en palmitoyl-ACP (δ11 C16 1:1) et en oléoyl-acp (δ13 C18 1:1) en détectant l’activité enzymatique, la teneur en acides gras et la teneur en acide phénolique, qui à leur fois régule la teneur des deux chaînes latérales monoényle, l’acide oléique (C22:1 et C24:1). De plus, le Singhal [38] a établi un gradient de température (18, 23 et 28 °C) pour étudier les changements d’expression de gènes enzymatiques associés dans le tissu trichome du géraniumet a constaté que les niveaux d’expression du gène de déaturase de l’acide myristique (MAD, δ9 14 2:0 - Gène de dénaturase ACP) et de dénaturase stearoyl-ACP (SAD, δ9 18 La dénaturase 0-ACP) diminuait avec l’augmentation de la température.
Wang et al. [49] ont cloné un gène de désaturase stéaroyl-acp (SAD, δ9 18:0-ACP desaturase) à partir deGinkgo biloba feuille adncEt soumis feuilles de Ginkgo biloba au stress de la température (4, 15 et 45 °C). Les résultats ont montré que l’expression génétique était élevée à basse température (4 °C) et à température ambiante (15 °C), tandis que l’expression génétique à haute température (45 ℃) était plusieurs fois inférieure à celle du groupe témoin. Par la suite, Liu Xinliang et al. [50] [traduction] ont montré que le gène GbSAD code une chaîne peptidique d’une longueur de chaîne de 412 aa et d’un poids moléculaire de 47 kDa. L’analyse par grappes a montré un degré élevé de similitude avec les séquences d’acides aminés stéaroyl-acp désaturase (SAD) d’autres gymnospermes. Des expériences d’hormones exogènes ont montré que l’expression du gène GbSAD n’était pas régulée par l’acide abscisique (ABA), le jasmonate de méthyle (MeJA) ou l’éthylène (ETH), mais par l’expression du gène activé par l’acide salicylique (SA), la valeur d’expression la plus élevée étant 9,7 fois celle du groupe témoin, ce qui indique que le SA peut être impliqué dans la régulation de la voie de synthèse des acides gras.
Pelargonium graveolens etGinkgo biloba contient l’unique acide myristique acpDésaturase (MAD, δ9 14 désaturase acp) et désaturase acp acide stéarique (GbSAD, δ9 18 désaturase acp 0) respectivement. Les deux enzymes sont sensibles à la température et très actives à basse température. Les deux enzymes sont les seules désaturases solubles dans l’eau des plantes et présentent un degré élevé de similarité en termes de structure fonctionnelle. Par conséquent, la vérification de la fonction homologue de la stéaroyl-acp desaturase de ginkgo (GbSAD, δ9 18:0-ACP desaturase) permettra de clarifier davantage le mécanisme de synthèse de l’acide ginkgolide.
2.2.4 polykétide synthase de Type III (PKS III)
Les synthases polycétide sont divisées en trois catégories: ①PKS I, connu sous le nom de PKS modulaire, est composé de plusieurs polypeptides multifonctionnels, dont chacun porte un domaine catalytique unique et non réutilisable. PKS II, également connu sous le nom de PKS itératif ou aromatique, est un système itératif d’un complexe multi-enzymatique qui utilise un ensemble de domaines réutilisables pour catalyser la formation de structures de polycétone de phénol plusieurs fois au cours des étapes de réaction répétées. ③PKS III, connu sous le nom d’enzyme de type chalcone synthase, est complètement différent des deux premiers types de familles d’enzymes PKS. Il peut réutiliser des protéines bifonctionnelles homologues, ne repose pas sur l’activation de l’acp et de son site actif 4&#Il n’est pas nécessaire d’activer le substrat acyl-CoA par l’intermédiaire de l’acp pour réagir directement avec l’acyl-coa. Bien que les mécanismes structuraux des différents types de KS soient différents, ils utilisent tous le domaine kétosynthase (KS) ou sous-unité pour catalyser la formation de liaisons C-C, qui décarboxylate et condense acyl-CoA pour prolonger la chaîne du carbone.
La famille PKS III est très diversifiée. Chalcone synthase (CHS) et stilbène synthase (STS) sont les deux premières familles découvertes et les plus représentatives. Leurs séquences d’acides aminés sont de 60% à 75% semblables [42]. La famille des chalcone synthase (CHS) est largement présente dans les plantes. Il s’agit d’une protéine homodimère d’un poids moléculaire de 40-45 kDa. En utilisant un centre actif hautement conservé (une combinaison de Cys-His-Asn), il catalyse l’allongement de la chaîne de carbone de coumarine CoA en utilisant trois substrats de pyruvate-CoA pour former une structure d’anneau intermédiaire de tétrapeptide [42, 51-52]. L’ion hydrogène C6 de l’anneau intermédiaire du tétrapeptide subit une réaction de condensation de Claisen avec le groupe cétone C1 pour former un anneau à cycle hexachlorocarbone, qui est ensuite aromatisé pour former une diphénylcétone, également appelée chalcon (Figure 5). Chalcone est un précurseur important pour la synthèse des flavonoïdes. L’enzyme stilbène synthase (STS) a été rapportée chez des plantes et des microorganismes (par exemple Streptomyces, levures et bactéries). Il a un poids moléculaire d’environ 43 kDa, est un dimère composé de 2 sous-unités, et possède une protéine avec un domaine spécifique conservé IPNS(F) AGAIAGN, qui est très homologue à la chalcone synthase (CHS) [53] [traduction].
L’enzyme STS utilise le coumaroyl CoA comme substrat pour former une structure d’anneau intermédiaire de tétrapeptide. Le groupe C7 cétone de l’anneau intermédiaire tétrapeptide subit une réaction de condensation Aldol avec l’ion hydrogène C2 pour former un anneau de carbone à six membres, puis aromatisé pour former le glycoside phytoalexdansresvératrol [54] (Figure 5). Singhal [38] a trouvé une kétoacyl CoA synthase de type 2 (KCS2, Keto-acyl CoA synthase 2) dans le geranium (Pelargonium hortorum), sa structure spatiale tertiaire est similaire à celle de polyketide synthase de type III (PKS III), Et il est supposé être impliqué dans la réaction de condensation de cyclization dans la voie de synthèse de l’urushiol. Ktoacyl CoA synthase (KCS) est une enzyme limitant le taux qui catalyse la première réaction de condensation dans la synthèse d’acides gras à très longue chaîne (VLCFAs). La recherche sur sa famille de gènes s’est principalement concentrée sur la plante modèle Arabidopsis thaliana, et il existe peu de rapports de recherche sur d’autres plantes. Costaglioli et al. [55] ont classé les 21 membres du gène KCS chez Arabidopsis en quatre sous-groupes (FAE1, KCS1, FDH Het CER6) en fonction de l’homologie génétique et de l’analyse de l’évolution génétique. Parmi eux, le gène FAE1 a été le premier gène de la famille KCS cloné par James et al. [56] à l’aide de la méthode de marquage par transposon. La séquence d’acides aminés de FAE1 est très homologue à d’autres synthases polykétide (chalcone synthase (CHS), squalene synthase (STS) et kétoacyl-acp synthase de type III (KAS III)).
La ktol-acyl CoA synthase (KCS) de différentes espèces a des spécificités de substrat différentes. Ginkgolide A appartient à la Laque substances acides Et sa synthase polykétide de type III spécifique à la voie (PKS III) est similaire en termes de sa structure fonctionnelle à géranium&#En outre, la polykétide synthase de la voie de l’acide urushiol et l’acyltransférase (STS) reconnaissent toutes deux que le groupe C7 cétone dans l’anneau intermédiaire tétrapeptide et l’ion hydrogène C2 subit une réaction de condensation aldol pour former un anneau à cycle hexa de carbone. La différence est que l’acyltransférase (STS) subit une réaction de décarboxylation lors de la réaction de cyclisation de condensation aldol, qui oxyde le groupe cétone en position C1 pour libérer du dioxyde de carbone. Cependant, lors de la cyclisation polycétide de l’acide lactonique, le groupe cétone C1 est retenu, et la structure de l’acide benzoïque est formée par le remplacement de CoA par un ion hydrogène (H+). Le mécanisme catalytique actuel n’est pas encore clair et nécessite des recherches supplémentaires.
2.2.5 polykétide cyclase (PKS-cyclase)
L’acide 2,4-dihydroxy-6-pentylbenzoïque (acide olivétique), également connu sous le nom d’acide olivétique, est un précurseur important pour la synthèse des cannabinoïdes. Gagné et al. [57] ont constaté que l’hexanoyl-coa est catalysé par le PKS III (TKS) du cannabis pour synthétiser une structure d’anneau intermédiaire de tétrapeptide contenant 12 carbones. Si l’enzyme TKS continue à catalyser, la chaîne acyle est condensée et cyclisée aux positions C2 et C7, libérant du CO2 pour former le 3,5-dihydroxy-pentylbenzène (Olivetol); Tandis que la réaction de condensation et de cyclization catalysée par le PKS cyclase (acide olivétique cy- classe, OAC) catalyse une réaction de condensation qui retient le groupe carboxyle C1 pour produire de l’acide 2,4-dihydroxy-6-pentylbenzoïque (acide olivétique). L’analyse de la fonction protéique montre que l’enzyme OAC contient une topologie unique de β-α-β-β-α-α-β et peut catalyser la cyclisation du groupe acyle aux positions C2 et C7 et retenir le groupe carboxyle.
OAC est une nouvelle protéine fonctionnelle contenant un domaine dimerique α+β barrel (dimeric α+β barrel protein, DABB), qui se trouve principalement dans les bactéries, les champignons et les plantes. À l’exception de l’acide cannabidiolique cyclase CsOAC de Le Cannabissativa, les protéines de type barb des plantes sont principalement de la famille des protéines stables à la chaleur (HS) et sont très semblables en structure aux polykétide cyclases des espèces de Streptomyces [58] [traduction]. La protéine DABB est une petite protéine (12 kDa, 101 aa) qui est localisée dans le cytoplasme avec le PKS III, joue un rôle de chaperone en guidant le pliage du produit intermédiaire tétrapeptide, et forme finalement une substance contenant une structure d’acide benzoïque. Les recherches de gagné et al. [51] ont retenu le groupe cétone C1 pour la cyclization polykétide de la synthèse de l’acide laconique, fournissant de nouvelles références et idées pour le processus catalytique de formation d’acide benzoïque.
3 perspectives
Dans les années 1960,Ginkgolides ont été identifiés comme l’une des substances activesDans la couche extérieure de graines de ginkgo. Avec la vulgarisation de la technologie de chromatographie liquide et spectrométrie de masse à haute performance (HPLC-MS/MS) et l’amélioration de la précision de détection de la RMN (technologie de résonance magnétique nucléaire), il est maintenant possible d’isoler et d’identifier les cinq acides de ginkgo communs et quatre ginkgolides à partir de tissus tels que les feuilles et les fruits de ginkgo. Les Ginkgolides sont des laques et ont des propriétés polaires uniques (hydrophobes et hydrophiles), qui ont conduit à leur utilisation dans de nombreux domaines tels que la médecine, la chimie, la beauté et la lutte antiparasitaire. En particulier, Fukuda et al. [59] ont montré que l’acide ginkgolique (C15:1) empêchait l’acylation de petites protéines modificatrices liées à l’ubiquitine (SUMO) pour réguler les fonctions cellulaires connexes. Il est considéré comme un médicament potentiel pour le traitement du cancer et des maladies neurologiques et est digne de la recherche et du développement.
In Ajout au ginkgoLes acides d’urushiol ont également été isolés et identifiés dans des cultures commerciales telles que l’anacardier (C. equatorialis), le sumac, les pistaches et les géraniums. Schultz et al. [60] ont mené des expériences sur la synthèse de l’acide urushiol. Les résultats ont montré que l’acide citrique marqué au 14c, le propionyl-CoA, l’oléoyl-coa, l’acide acétique, l’acide myristique et l’acide palmitique étaient incubés avec des cellules trichomes de Pelargonium graveolens. Seul l’oléoyl-coa (C18:1) s’est révélé impliqué dans la synthèse de L’urushiol est une source efficace de carbone, tandis que les autres substances ont tendance à synthétiser le triacylglycérol pour former des lipides de stockage. Par conséquent, le palmitoléoyl-coa (C16:1) et l’oléoyl-coa (C18:1) ont été identifiés comme des précurseurs importants pour l’étude de la synthèse de l’acide lacosane. Cependant, le ginkgolide, en tant que phytoalexine unique au ginkgo, a une voie de synthèse et de régulation moléculaires spéciales et conservées. À l’heure actuelle, la recherche sur la régulation de la synthèse du ginkgolide se concentre principalement sur le transcriptome lipidique et l’analyse métabolomique, alors qu’il existe peu de rapports sur l’exploration du mécanisme de synthèse du polykétide et le clonage de gènes apparentés, des recherches plus poussées sont donc nécessaires.
Les facteurs de transcription MYB et WRKY peuvent réguler l’expression des membres de la famille des polycétide synthase de type III (PKS III), affectant les changements dans le contenu des métabolites secondaires avec des effets de résistance. L’enzyme limitant le taux clé dans la synthèse des acides de laque est une synthase polykétide de type III (PKS III) qui est très homologue à ktoacyl CoA synthase (KCS). Eckermann et al. [61] ont découvert que l’herbicide métazachlore peut inactiver l’enzyme limitant le taux (ktolacton CoA synthase (KCS)) dans la synthèse des acides gras à très longue chaîne (vlfa) ainsi que la chalcone synthase (CHS) et la squalène synthase (STS) de la famille des polykétide synthase III. Le chloroacétamide métazachlore peut se lier à la cystéine au site clé de l’enzyme en question, empêchant ainsi la réaction de condensation de se dérouler normalement. À l’avenir, la substance chimique sera vérifiée à l’aide d’unCellule de suspension ginkgoLigne pour déterminer s’il peut également inactiver la polykétide synthase de type III (PKS III) qui synthétise l’acide laconique. Cela permettra de mieux comprendre la fonction catalytique et le mécanisme de régulation de la polykétide synthase de type III (PKS III) dans la synthèse de l’acide laconique. L’élucidation progressive de ces mécanismes de régulation fournira des conseils théoriques et pratiques pour la culture de lignées cellulaires à faibles ou à hauts rendements en acides phénoliques.
Références:
[1] Ma Jing, Huo Xiaoqian, Chen Qian et al. Recherche sur le dépistage potentiel anti-nouveau coronavirus médecine chinoise basée sur Mpro et PLP [J]. Chinese Journal De laTraditional Chinese Medicine, 2020, 45(6): 1219-1224.
[2] Wang Sujuan, Kang An, Di Liuqing, et al. Progrès dans la recherche pharmacocinétique des principaux ingrédients actifs de l’extrait de Ginkgo biloba [J]. Chinese Herbal Medicine, 2013, 44 (5) : 626-631.
[3]Zhang Xinhui, Guo Qirong, Wang Guibin, et al. Progrès de la recherche sur la couche de graines de ginkgo biloba [J]. Heilongjiang Agricultural Science, 2018(11) : 156-160.
[4]ITOKAWA H,TOTSUKA N,NAKAHARA K,et al.antitumorale Principes du Ginkgo biloba L.[J]. Chimique et pharmaceutique Bulletin,1987,35 (7) : 3016-3020.
[5]GELLERMAN J J JJ JL,SCHLENK KH. Préparation de 14 acides gras et anacardiques marqués au c de Ginkgo biloba[J]. Lipids,1969,4 (6) : 484-487.
[6]GELLERMAN J L,ANDERSON W H,SCHLENK H. Biosynthesis De laanacardiqueacidesfrom acetate dansGinkgo biloba[J].Lipids,1974,9(9) : 722-725.
[7]GELLERMAN J L,ANDERSON W H,SCHLENK H. Synthèse de l’anacardique Acides dans les graines de Ginkgo biloba[J]. Biochimica et La biophysique Acta,1976, 431 (1) : 16-21.
[8] Wang J, Yu B, Liu X, et al. Isolement et identification des constituants chimiques dans l’enveloppe extérieure des graines de Ginkgo biloba [J]. Chinese Herbal Medicine, 1995, 26(6): 290-292, 328.
[9] Li Hongqing, He Zhaofan, Zhang Yongmin, et al. Recherche sur les composants hydroxyphénoliques et hydroxyphénoliques de l’acide dans l’enveloppe extérieure des graines de Ginkgo biloba [J]. Chinese Herbal Medicine, 2004, 35(1): 18-20.
[10]KOZUBEK A,TYMAN J H. Lipides phénoliques bioactifs [J]. Studies dansnatu- ral products chemistry,2005,30: 111-190.
[11] Cao Fuliang. The Ginkgo Biloba Journal De laChina [M]. Beijing: China Forestry Publishing House, 2007.
[12] [12]HESK D,CRAIG R,MUMMA R RO. Comparaison des capacités biochimiques de l’acide anacardique entre Résistant aux insectes Et sensibles Géraniums [J]. Journal De lachemical ecology,1992,18(8) : 1349-1364.
[13]GEDAN ° de catalogueP H,SAMPATHKUMARAN P S., S., S. Noix de cajou Liquide de coquille: Ex- traction, chimie Et en plus Applications [J]. Progrès réalisés dans biologique Coatings, 1986,14 (2) : 115-157.
[14] Wu Haixia, Wu Caie, Liu Jinda et al. Purification, identification et activité antibactérienne des ginkgolides des graines de Ginkgo biloba. Chinese Journal De laFood Science, 2015, 15(3): 207-215.
[15] Tian ZP, Yu W, He GZ, et al. Détermination de l’acide ginkgo total dans les feuilles de ginkgo biloba par HPLC [J]. Research on Trace Elements Et en plusHealth, 2015, 32(2): 36-37, 47.
[16] He Jingren. Recherche sur l’allergénicité et le mécanisme d’action de l’acide ginkgo [D]. Wuhan: université agricole de Huazhong, 2003.
[17] Liu Junfeng. Recherche sur le processus d’élimination des ginkgolides de la poudre de ginkgo [D]. Tai& 'an: université agricole de Shandong, 2017.
[18] en H Y,CHENG K C,HSU R J,et al. Dégradation enzymatique de l’acide ginkgolique par la laccase immobilisée sur un nouveau tapis de nanofibre électrofilée [J]. Journal De laLe conseil des ministresscience of food Et en plusagriculture,2020,100(6) : 2705- 2712.
[19] Liang Lixing. État de la recherche et perspectives de développement de l’enveloppe extérieure des graines de ginkgo [J]. China Resources Comprehensive Utilization, 2003, 21 (10): 12-14.
[20] Zhao Chenglin. Extraction et discussion médicinale des composants acides dans l’enveloppe extérieure des graines de ginkgo [J]. Chinese Herbal Medicine, 1997, 28(4): 250-251.
[21] Ji Yuliang. Étude préliminaire sur l’inhibition des bactéries pathogènes des cultures par l’extrait d’enveloppe de graines de ginkgo biloba [J]. Anhui Agricultural Science, 2005, 33(9): 1598-1603.
[22] Xu Lichun, Tong Kun, Gu Weirong et autres. Étude expérimentale sur l’inhibition de la croissance fongique par des intermédiaires extraits de l’enveloppe extérieure des graines de ginkgo [J]. Traditional Chinese Medicines, 1990, 13(6): 36-37.
[23]MUROI H,KUBO I. Activité antibactérienne de l’acide anacardique et du totarol,a- lone Et en plus dans combinaison avec Méthicilline, contre Résistant à la méthicilline Staphylococcus aureus[J]. Revue de presse of appliqué Bactériology,1996,80(4) : P. 387-394.
[24] Shi Qitian. Recherche sur la prévention et la lutte contre les ravageurs agricoles par ginkgolides [J]. Forest Chemical Industry, 2004, 24 (2): 84-87.
[25] Deng Yecheng, Xu Hanhong, Lei Ling. Toxicité par Contact de l’extrait de ginkgo biloba contre trois parasites agricoles [J]. Journal of South China Agricultural University, 2004, 25(3): 61-63.
[26]HILL G A,MATTACOTTI c,GRAHAN ° de catalogueW D. Le principe toxique du lierre venimeux [J]. Journal of Le conseil des ministresAmerican chemical Society,1934,56(12) : 2736 — 2738.
[27] Cheng Liang, Lou Fengchang. Aperçu de la recherche sur les ginkgolides dans l’enveloppe extérieure des graines de Ginkgo biloba [J]. Advances dansPharmacy, 2004, 28(5): 209-213.
[28]VINCIERI F F,VINCENZINI M T,VANNI P. Extraction des composés actifs des sarcotesta de Ginkgo bilobaseed: Inhibition de l’activité de certaines déhydrogénases [J]. Article de Journal,2013,63(2) : 79-82.
[29]AHLEMEYER B,SELKE D,SCHAPER C,et al.les acides ginkgoliques induisent la mort neuronale Et en plus activer protéines Phosphatase type-2C[J]. European journal of pharmacology,2001,430(1) : 1-7.
[30] Yang Jianting, Wu Cae. Progrès de la recherche sur les composants allergènes du Ginkgo biloba et leur mécanisme de sensibilisation [J]. Food Science Et en plusTechnology, 2009, 34 (6): 282-286.
[31]AL-YAHYA A A,AL-MAJED A A,AL-BEKAIRI A M,et al.études sur la toxicité reproductive, cytologique et biochimique du Ginkgo biloba chez des souris albinos suisses [J]. Journal of ethnopharmacology,2006,107 (2) : 222 — 228.
[32]JIANG L,SI Z H,LI M H,et al.1 H étude métabolomique à base de MRN des dommages au foie induits par l’acide ginkgolique (15 1:1) dans souris [J]. Journal of phar- analyse pharmaceutique et biomédicale,2017,136: 44-54.
[33]YAO Q Q,LI L,XU M C,et al.The Métabolisme et hépatotoxicité de Ginkgolicacid (171:1) in vitro[J]. Revue chinoise De naturel Médicaments, 2018,16(11) : 829-837.
[34]QIAO L N,ZHENG J B,JIN X Z,et al.l’acide ginkgolique inhibe l’inva - sivité des cellules cancéreuses du côlon par l’activation AMPK [J]. Oncology let- ters,2017,14 (5) : 5831-5838.
[35] LIANG J R,YANG H. : ginkgolique Acide (GA) supprime gastrique Croissance du cancer Par: induire Apoptose et supprimer Signalisation STAT3/JAK2 régulée par ROS[J/OL]. La biomédecine & & Pharmacothérapie,2020,125 [2020-03-21]. HTTPS: doi. Org / 10.1016/j.biopha.2019.109585.
[36]LIU Y X,YANG B,ZHANG L R,et al. L’acide ginkgolique induit une interaction Entre l’apoptose et autophagie réglementé Par: Les ROS génération in Colon colon Cancer [J]. biochimique and biophysique La recherche Communications,2018, 498(1) : 246-253.
[37]WALTERS D S,CRAIG R,MUMMA R O. Incorporation d’acides gras dans la biosynthèse des acides anacardiques des géraniums [J]. Phytochemistry,1990,29 (6) : 1815-1822.
[38]SINGHAL R A. Identification and caractérisation Des gènes impliqués in Métabolisme du monoène n5 précurseurs À propos de N ° 5 anacardic acids in Le conseil des ministres Tri - chomes de Pelargonium x hortorum[D]. Louisville: université of Louis- ville,2016.
[39]NARNOLIYA L K,KAUSHAL G,SINGH S P et al.De novo transcriptome Analyse des Parfumé de rose geranium Fournit un aperçu du métabolisme Spécificité de la biosynthèse du terpène et de l’acide tartrique [J]. BMC Genomics,2017,18(1) : 1-14.
[40] Wu Yongmei, Mao Xue, Wang Shujian et al. Ingénierie métabolique des acides gras ω-7 végétaux [J]. Acta Botanica Sinica, 2011, 46(5): 575-585.
[41]SCHULTZ D J,CAHOON E B,SHANKLIN J,et al. 14 ans: Protéine porteuse 0-acyl gène de désaturase d’acide gras est nécessaire pour la production de ω5 Acides anacardiques présents dans le géranium résistant aux parasites (Pelargoni- um xhortorum) [J]. Débats du parlement européen of the Académie nationale de Sciences,1996,93(16) : 8771-8775.
[42]SHI S P,MORITA H,WANIBUCHI K,et al.synthèse enzymatique des polyketides végétaux [J]. Current organic synthesis,2008,5(3) : 250-266.
[43] Li Mengjun, Shi Zhanliang, Guo Jinkao et al. Analyse de séquence de la famille des gènes de la protéine porteuse de l’acyle [J]. Journal of North China Agricultural University, 2010, 25(S1): 1-6.
[44]KOGLIN A,MOFID M R,LHR F,et al.commutateurs conformationnels modu- protéines tardive Les interactions in Synthétases antibiotiques peptidiques [J]. Science, 2006,312 (5771) : 273-276.
[45] Li Lu, Liang Qian, An Xi, et al. Analyse bioinformatique de la famille des gènes perilla β-ketoacyl ACP synthase [J]. Shanxi Agricultural Science, 2017, 45(3): 321-324.
[46] Hao Qingting. Identification et analyse fonctionnelle du gène de la famille β-ketoacyl-ACP synthase II (KAS II) dans le coton de montagne [D]. Taigu: université d’agriculture du Shanxi, 2018: 59.
[47]KACHROO A,SHANKLIN J,WHITTLE E,et al.arabidopsis stearoyl- acyl carrier protéine-désaturase famille et la contribution des isoformes foliaires À la synthèse de l’acide oléique [J]. Plant molecular biology,2007,63(2) : 257-271.
[48]TAHA R S,ISMAIL I,ZAINAL Z,et al. La protéine stéaroyl-acyl-porteuse Le promoteur de désaturase (Des) du palmier à huile confère une excrétion de GUS spécifique au fruit dans la tomate transgénique [J]. Journal of plantephysiology,2012,169(13) : De 1290 à 1300.
[49]WANG H L,CAO F L,ZHANG X W,et 1. Clonage and expression De stéaroyl-acp desaturase et de deux oléates desaturases de Ginkgo bi- loba L.[J]. Plant molecular biology reporter,2013,31 (3) : 633-648.
[50] Liu Xinliang, Cai Jinfeng, Wang Huanli, et al. Réponse du gène Ginkgo biloba SAD au stress abiotique et à l’expression procaryotique [J]. Journal of Northeast Forestry University, 2015, 43(12): 1-6.
[51]NAKANO C,OZAWA H,AKANUMA G,et al.biosynthèse of Polykétides aliphatiques par polykétide synthase et méthyltransférase de type III dans Ba- cillus subtilis[J]. Journal of bactériology,2009,191 (15) : 4916-4923.
[52] JEZ J M,AUSTIN M B,FERRER J L,et .structurel contrôle De polykétidéformation dans les synthases polykétide spécifiques à la plante [J]. Chimie &; Biology,2000,7 (12) Téléphone: 919-930.
[53] Liu Jingying, Tong Shaoming, Hou Hesheng. Progrès de la recherche et statut d’application du gène qhe [J]. Tianjin Agricultural Science, 2015, 21(4): 24-27.
[54]AUSTIN M B,BOWMAN M E,FERRER J,et al. Un interrupteur aldol a découvert in stilbène synthases Les médiateurs cyclization spécificité of type III Synthases polykétide [J]. Chemistry & biology,2004,11 (9) : 1179-1194.
[55]COSTAGLIOLI P,JOUBS J,GARCIA C,et al.profilage des gènes candidats Il participe à la biosynthèse de cire chez Arabidopsis thaliana par analyse de microréseaux. Biochimica et biophysica acta,2005,1734 (3) : 247-258.
[56]JAMES D W,JR,LIM E,KELLER J,et al. Marquage dirigé du gène Arabi- dopsis FATTY ACID ELONGATION1(FAE1) avec l’activateur transpo- son du maïs [J]. The plantecell,1995,7 (3) : 309-319.
[57] gagné S J,STOUT J M,LIU E,et al.Identification de olivetolicacid cyclase à partir de Cannabis sativa révèle a unique catalytique itinéraire À propos de plant Polykétides [J]. Proceedings of the national academy of sciences,2012,109 (31) : 12811-12816.
[58] Maiti, A. R., et Maji. Progrès de la recherche sur la nouvelle famille multifonctionnelle de protéines DABB. Genomics and Applied Biology, 2018, 37(12): 5460-5472.
[59]FUKUDA I,ITO A,HIRAI G,et Al.l’acide ginkgolique inhibe les protéines SU- MOylation par blocage de la formation de l’intermédian E1-SUMO [J]. Chem- ministry & biology,2009,16(2) : 133-140.
[60]SCHULTZ D J,WICKRAMASINGHE S,KLINGE C M. Chapitre six - biosynthèse de l’acide anacardique Et bioactivité [M] r ROMEO J T. récent Les progrès en phytochimie. Amsterdam: Elsevier,2006: 131-156.
[61]ECKERMANN C,MATTHES B,NIMTZ M,et al.liaison covalente de chloro-roacétamide Les herbicides À propos de the active site La cystéine of plant type III Synthases polykétide [J]. Phytochemistry,2003,64 (6) : 1045-1054.
