Étude des avantages de l’extrait de riz noir pour l’hyperlipémie

Le riz noir est noir en raison de sa teneur élevée en anthocyanes. Xia et al. [1] et Ling et al. [2] [3] [traduction]ont trouvé dans le cadre de recherches expérimentales sur des animaux que le riz noir alimentaire peut réduire le taux de lipides sanguins des animaux de laboratoire, inhiber l’apparition et le développement de l’athérosclérose, et spéculent que cet effet est lié aux anthocyanines dans la couche de graines. De plus, les effets de l’extrait de riz noir sur les radicaux libres et les effets antioxydants ont été confirmés dans certaines expériences de simulation chimique In vitro [4] [5] [6] [7]. Cependant, il y a encore peu de recherches sur les principaux principes actifs de l’extrait de riz noir et son activité physiologique dans le corps.

Cet article étudieAvantages de l’extrait de riz noirPour les rats d’hyperlipémie et analyse la composition et la teneur en anthocyanes et acides gras. Il a été déduit que les anthocyanosides et les acides gras insaturés présents dans les extraits de riz noir constituent la base importante des effets antioxydants et lipidiques du riz noir.

En savoir plus. Matériaux et méthodes

1.1 matériaux expérimentaux

1.1.1 réactifs et Instruments

La capacité antioxydante totale (TAC), l’activité de la glutathion peroxydase (GSH-Px), la teneur en malondialdéhyde (MDA) et l’activité de la superoxyde dismutase (SOD) ont été fournies par l’institut de recherche en bioingénierie de Nanjing Jianjian; Cholestérol Total total(TC) et triglycérides (TG) ont été fournis par Beijing Zhongsheng Bioengineering Hi-Technology Company; LDL-C et HDL-C ont été fournis par Wenzhou East Biological Engineering Company. Les trousses de cholestérol total (TC) et de triglycérides (TG) ont été fournies par Beijing Zhongsheng Bioengineering Hi-Tech Company; Les trousses de cholestérol de lipoprotéines de basse densité (LDL-C) et de cholestérol de lipoprotéines de haute densité (HDL-C) ont été fournies par Wenzhou East Biological Engineering Company. Tous les autres réactifs chimiques utilisés dans l’analyse étaient pure analytique domestique.

1.1.2 préparation d’extraits de riz noir

La variété de riz noir était "Longjdans1" Cultivé par l’institut de recherche sur le riz de l’académie des Sciences agricoles de Jildanset fourni par l’institut de recherche en biotechnologie de l’académie des Sciences agricoles de Guangdong. Riz noir frais de "Longjdans1" (40 mesh) a été extrait avec 60% d’éthanol comme solvant à 50 °C et concentré sous pression réduite pour obtenir un extrait de zeste de riz noir sirupeux rouge foncé.

La préparation d’extraits de riz noir a été dissoute dans de l’eau distillée et préparée dans des solutions à 5%, 10% et 20%, qui ont été utilisées comme matériaux de gavage pour les trois groupes d’essai BRPE de faible, moyen et élevé, et stockées à 4 ℃, et utilisées dans les 2 semaines suivant la préparation.

1.1.3 animaux et groupes de laboratoire

Soixante rats SD mâles de qualité propre, pesant 160±20 g, ont été fournis par le centre des animaux de laboratoire de l’université de médecine traditionnelle chinoise de Guangzhou. Les animaux ont été nourris avec de la nourriture normale pendant une semaine pour s’acclimater à l’environnement, puis du sang a été prélevé dans le plexus de la veine orbitale. Selon le taux de cholestérol total, les animaux ont été répartis au hasard en 5 groupes: un groupe témoin, un groupe modèle et 3 groupes expérimentaux de doses faibles, moyennes et élevées de BRPE, avec 12 rats dans chaque groupe, et ont été nourris avec des aliments différents selon le plunde l’expérience, puis entrés dans la période expérimentale.

1.2 alimentation et manipulation des animaux

L’alimentation animale a été effectuée dans le laboratoire pour animaux propres de l’université de médecine traditionnelle chinoise de Guangzhou. Tous les groupes de rats ont été logés dans des cages distinctes selon les groupes, à l’exception du groupe témodansqui a été nourri avec un régime de base, les 4 autres groupes ont été nourris avec un régime riche en matières grasses (contenant 85% de régime de base, 10% de poudre de jaune d’œuf, 5% de saindoux, 0,5 % de cholate de sodium). Au cours de la période expérimentale, le groupe témoin et le groupe modèle ont reçu 1ml/100g de poids corporel de solution saline par gavage tous les jours, et les groupes de 5%, 10% et 20% de BRPE ont reçu 1ml/100g de poids corporel de 5%, 10% et 20% de BRPE, respectivement, et ont été nourris et abaissé ad libitum, et la quantité d’aliments consommés a été enregistrée tous les trois jours. La période expérimentale a été de 8 semaines. Après l’expérience, les animaux ont été jeûnés pendant 8 h, les yeux ont été enlevés pour recueillir le sang et séparer le sérum, qui a été divisé et stocké à -20℃ pour une utilisation future. Les animaux ont été tués par la méthode de dislocation cervicale, et les foies ont été séparés et stockés à -20℃.

1.3 indices et méthodes de détection

1.3.1 détermination du taux de lipides sanguinsTC, HDL-C et TG par la méthode enzymatique CHOD-PAP. LDL-C est mesuré par la méthode directe, 7060 analyseurs biochimiques automatiques.

1.3.2 Isolation, La Purificationet oxydation du Plasma LDL. 

Les LDL dans le Plasma ont été séparés par centrifugation par gradient de densité, et la teneur en protéines LDL a été mesurée à l’aide d’une méthode à basse température.#39; méthode S. La teneur en protéines LDL a été mesurée par Lowry&#La Modification du systèmeoxydative des LDL a été effectuée par oxydation Cu2+ [8]. La pureté et le degré d’oxydation des LDL ont été déterminés par électrophorèse sur gel d’agarose, et le degré de modification des LDL a été mesuré par mobilité électrophorétique relative (REM). Les résultats électrophorétiques ont montré que le REM de ox-LDL était de 1,4.

1.3.3 détermination du titre des anticorps Anti-ox-LDL dans le sérum de Rat 

Selon les instructions du Kit ELISA Protein DetectroTM,la concentration d’ox-ldl préparé et de LDL naturel a été diluée à 10 µg de protéines avec une solution de revêtement 1×. Les concentrations d’ox-ldl préparées et de LDL naturelles sont diluées à 10 µg de protéine-ml-1 avec une Solution de revêtement 1× et incubées dans la Plaque plaquependant la nuit à 4°C. La plaque est lavée 3 fois avec une Solution de lavage puis ajoutée à la plaque avec 100 µg de protéine-ml-1. La plaque est lavée 3 fois avec un tampon de lavage, puis une solution d’anticorps secondaire diluée 1:500 avec 100 µl de diluant/solution bloquante 1 bsa est ajoutée et incubée pendant 1 h à température ambiante.

Après un lavage en profondeur, 100 µl de solution de substrat a été ajouté et la réaction a été terminée en ajoutant 100 µl de solution de terminus de réaction après 30 min et lue à 405 nm sur un compteur d’enzymes. Le titre de l’anticorps anti-ox-LDL dans le sérum est exprimé comme la valeur d’absorbance de ox-LDL moins la valeur d’absorbance de LDL [9].

1.3.4 préparation de l’homogénéat du tissu hépatique et détermination de la teneur en protéines 

Prenez le tissu de foie et rincez-le dans une solution saline froide, enlevez le sang, essuyez le sec avec du papier filtre, pesez-le, employez la solution saline stérilisée comme milieu d’homogénéisation, faites le foie de 10% homogénéiser (w:v) à 4℃, centrifugez-le à 4℃ pendant 15 min à 3,000g, prenez le surnageant en portions, stockez-le à -20℃ et le réserve pour l’usage, puis déterminez la teneur en protéines avec Bradford' méthode S.

1.3.5 détermination de la capacité antioxydante totale (TAC) sérique et hépatique, de l’activité gazeuse, de l’activité GSH-Px et de la teneur en MDA 

TAC, gazon, activité enzymatique GSH-Px et MDA ont été mesurés par spectrophotométrie selon les instructions de la trousse.

1.3.6 détermination de la teneur en anthocyanes dans les extraits

Les quatre anthocyanosides, à savoir le cornflowerin-3-glucoside, le cornflowerin-3,5-diglucoside, le géronolin-3,5-diglucoside et la mallowine, qui ont été purifiés indépendamment et identifiés comme répondant à la norme de pureté chromatographique ont été utilisés comme normes [7], puis déterminés par la méthode HPLC.

1.3.7 détermination de la teneur en acides grasDans les extraits, la teneur en acides gras est analysée par chromatographie en phase gazeuse et spectrométrie de masse (GC-MS).

1.4 traitement des données et analyse statistique

Le progiciel SPSS 10.0 a été utilisé pour l’analyse statistique. L’homogénéité des variances a été vérifiée pour les moyennes de plusieurs groupes; Si les écarts n’étaient pas homogènes, une ANOVA à sens unique a été effectuée après l’échange des variables pour obtenir l’homogénéité; La méthode du LSD a été utilisée pour les comparaisons deux par deux entre les groupes.

En savoir plus. Résultats et analyses

2.1 effets de l’extrait de zeste de riz noir sur les lipides sanguins chez les Rats hyperlipidémiques

Le tableau 1 énumère les taux de lipides des rats de chaque groupe, ce qui permet de constater que, par rapport au groupe modèle, les taux sériques de TC et de TG des trois groupes de BRPE ont été significativement réduits (P< 0,05), et que le groupe de 20% de BRPE était proche ou même inférieur à celui du groupe témoin, avec une certaine relation dose-effet entre les trois groupes posologiques, et que la teneur en HDL-C des trois groupes de BRPE était significativement plus élevée que celle du groupe modèle (P< 0,05). Les taux de HDL-C dans les trois groupes de BRPE étaient significativement plus élevés que ceux du groupe modèle (p et lt; 0,05). 10% et 20% de BRPE ont également été en mesure de réduire les niveaux de LDL-C (P< 0,05), tandis que 5% de BRPE n’ont eu aucun effet significatif (P> 0,05).

Tableau 1 effet de l’extrait de riz noir sur les taux de lipides sanguins chez le rat (mmol·L-1, x± S,n=12)

CG = groupe témoin,MG = groupe modèle

Les valeurs dans la colonne sans lettre commune sont significativement différentes, P<0.05. Le même que ci-dessous.

2.2 effets de l’extrait de riz noir sur l’indice athérosclérotique de Rats hyperlipidémiques

L’indice athérosclérotique (ia) est un paramètre qui intègre plusieurs indicateurs de lipides sanguins pour refléter le risque d’athérosclérose (AS), et une augmentation de l’ia suggère une augmentation de la probabilité de AS. Le tableau 2 montre que les valeurs AI1 - les et AI2 des trois groupes de dose étaient significativement inférieures à celles du groupe modèle (P< 0,05), et il y avait une relation dose-effet entre les trois groupes.

Tableau 2 effet de l’extrait de riz noir sur l’indice d’athérosclérose chez le rat (x± S,n =12)

AI1 =(TC-HDL-C)/HDL-C ,AI2 = LDL-C/HDL-C

2.3 effet antioxydant de l’extrait de riz noir sur les Rats hyperlipidémiques

2.3.1capacité antioxydante totale

Le TAC sérique et hépatique des rats du groupe modèle était inférieur à celui du groupe témoin lorsque l’hyperlipidémie se manifestait. L’absorption de BRPE a augmenté le TAC chez les rats, parmi lesquels la faible dose de BRPE avait tendance à augmenter le TAC dans le foie, mais la différence n’était pas significative (p et gt; 0,05), mais le TAC sérique des animaux de ce groupe était significativement augmenté par rapport à celui du groupe témoin modèle (p et lt; 0,05). Le taux de BRPE de 10% et de 20% a considérablement augmenté le TAC sérique et hépatique, parmi lesquels le taux de TAC sérique du groupe de 20% de BRPE était plus élevé que celui du groupe témoin. Les taux de BRPE de 10% et de 20% ont considérablement augmenté le TAC sérique et hépatique, le groupe de BRPE de 20% ayant des taux de TAC sérique plus élevés que le groupe témoin (p et lt; 0,05).

Tableau 3 effet de l’extrait de riz noir sur la capacité antioxydante totale du sérum et du foie chez le rat (x± S, n =12)

2.3.2 activité enzymatique antioxydante et teneur en produit de peroxydation lipidique

La consommation à long terme de régimes riches en matières grasses a augmenté le taux de lipides sanguins des rats, diminué les activités du GSH-Px et du SOD et augmenté de façon significative la teneur en produits de peroxydation lipidique (MDA) (P< 0,05). La consommation de BRPE a augmenté l’activité des enzymes antioxydantes et a montré une certaine relation d’effet quantitatif (P< 0,05). Par conséquent, la teneur en MDA des rats des trois groupes recevant la dose était significativement inférieure à celle du groupe modèle (p et lt; 0,05), ce qui montre une relation d’effet quantitatif significative (tableau 4).

Tableau 4 effets de l’extrait de riz noir sur l’activité enzymatique antioxydante et la teneur en malondialdéhyde dans le sérum et le foie des Rats(x± S, n =12)

2.3.3 Anti-ox-LDL Niveau d’anticorps

Ox-LDL peut stimuler le corps à produire des anticorps, et son niveau d’anticorps peut refléter la production d’ox-ldl dans une certaine mesure. Comme le montre le tableau 5, en plus de l’augmentation du taux de LDL-C, le taux d’anticorps anti-ox-LDL dans le groupe modèle était significativement plus élevé que dans le groupe témoin (p et lt; 0,05), et la consommation de BRPE a réduit considérablement la production d’anticorps anti-ox-LDL (p et lt; 0,05), ce qui a montré une relation dose-dépendante.

Tableau 5: taux de croissance annuels Effet de l’extrait de riz noir sur les concentrations sériques d’anticorps anti-ox-ldl chez le rat (x± S, n =12)

Tableau 6: taux de croissance annuels  Teneur en anthocyanes de l’extrait de riz noir

2.4. - Analyse des composants de l’extrait de riz noir

2.4.1 teneur en anthocyanes

Quatre anthocyanes, à savoir la cyanidine-3-glucoside, la cyanidine-3,5-diglucoside, le géranium-3,5-diglucoside et la malachitine, ont été détectées dans l’extrait de riz noir. Parmi eux, la cyanidine-3-glucoside avait la teneur la plus élevée, suivie par la cyanidine-3,5-diglucoside, et la malachitine avait la teneur la plus faible. Comme le montre le tableau 6, la teneur totale des quatre anthocyanes était de 43,43 g/100g.

2.4.2 teneur en acides gras

La composition des acides gras dans l’extrait de riz noir a des caractéristiques insaturées élevées. Parmi les 14 acides gras détectés, 6 sont des acides gras insaturés, représentant 87,66 % du total des acides gras. Les plus fortes proportions d’acides gras sont l’acide oléique et l’acide linoléique (tableau 7).

Tableau 7: taux de chômage des jeunes (en %) Teneur en acides gras de l’extrait de riz noir

En savoir plus. Discussion

3.1 effet de l’extrait de riz noir sur le métabolisme des lipides et les niveaux de Stress anti-oxydatif dans les organismes

L’hyperlipidémie est un facteur de risque indépendant pour AS. L’augmentation des niveaux de lipides, en particulier le LDL-C, est directement liée au développement de l’as, et le HDL-C a un certain effet anti-AS en raison de sa promotion du transporteur inverse du cholestérol et de l’activité antioxydante [10]. Par conséquent, la valeur de (TC-HDL)/HDL peut refléter le risque d’as dans une certaine mesure [11].

Dans la présente étude, il a été constaté que la consommation d’extrait de riz noir réduisait les concentrations sériques de TC, de TG et de LDL-C et augmentait les concentrations de HDL-C chez les rats riches en graisses nourris au choix, améliorant ainsi le métabolisme des lipides et diminuant le risque d’as, avec une dépendance quantitative significative à l’effet de la consommation. Des études ont démontré que l’hyperlipidémie est un inducteur majeur du stress oxydatif [12], et les radicaux libres générés par le stress oxydatif oxydent et modifient encore les LDL pour former l’ox-ldl, qui exerce un fort effet as-causant en induisant un dysfonctionnement endothélial, favorisant la phagocytose des lipides par les monocytes pour former des cellules mousses, et facilitant la synthèse et la sécrétion d’un grEt en plusnombre de cytokines et de molécules d’adhérence par les cellules vasculaires [13].

Dans la présente étude, la production de LDL de boeuf a été considérablement réduite chez les rats consommant l’extrait de riz noir, réduisant ainsi ses effets néfastes sur les vaisseaux sanguins. La diminution de la production d’ox-ldl peut être attribuée à la réduction de LDL chez les rats par l’extrait de peau de riz noir, et à l’amélioration des enzymes antioxydantes, qui piègent les radicaux oxygénés réactifs surproduits dans le corps et empêchent la modification oxydative de LDL.

3.2 effets antihyperlipidémiques et antioxydants des extraits de zeste de riz noir

Dans la présente étude, il a été constaté que l’extrait de riz noir pourrait améliorer le métabolisme des lipides, améliorer l’activité des enzymes antioxydantes et réduire la Formation des formateursde produits de peroxydation des lipides, possédant ainsi des activités biologiques antioxydantes et hypolipidemiques. Ce résultat est conforme aux effets du riz noir ou de la pelure du riz noir constatés par Xia et al [1] et Ling et al [2] [3].

Dans la présente étude, l’extrait de zeste de riz noir obtenu par extraction à l’éthanol était riche en pigments de riz noir et en huile de son de riz, et il a été confirmé que les anthocyanosides sont les principaux composants des pigments de riz noir [14][15]. Les anthocyanosides et l’huile de son de riz ont reçu beaucoup d’attention en raison de leurs fonctions physiologiques actives. Par conséquent, la présente étude s’est concentrée sur la composition et la teneur en anthocyanosides et acides gras dans l’extrait de riz noir. Les résultats ont montré que l’extrait contenait 43,43% d’anthocyanosides tels que le cornflower-3-glucoside et 14,5% d’acides gras insaturés tels que l’acide linoléique.

Des études sur l’activité antioxydante des anthocyanosides ont été largement rapportées, et Kano [16] et al. ont démontré que les anthocyanosides contenus dans la patate douce violette ont une activité antioxydante à la fois in vivo et in vitro. Sun Ling [7] et al. et Zhang Mingwei [6] et al. ont constaté que l’activité antioxydante in vitro de différentes variétés de riz noir présentait une corrélation positive très significative avec la teneur totale en anthocyanes de leur couche de graines (P < 0,01), ce qui suggère que les effets antioxydants du riz noir ou de ses extraits sont étroitement liés aux composés anthocyaniques. Par conséquent, les anthocyanosides peuvent être les principales substances actives dans l’effet antioxydant des extraits de riz noir.

Les acides gras insaturés l’acide oléique et l’acide linoléique riches en extrait de peau de riz noir appartiennent à la série n-6 d’acides gras insaturés. Des études de nutrition médicale ont montré que les séries n-3 et n-6 d’acides gras insaturés jouent un rôle important dans la réduction de TC sanguin et l’amélioration du métabolisme des lipides. Allman-F et al. ont constaté que l’huile de graines de tournesol riche en acide oléique dans l’alimentation peut réduire les niveaux de TC et de LDL dans le sang.

Il existe actuellement relativement peu de recherches sur l’effet des anthocyanes sur le métabolisme des lipides sanguins. Takanori et al. [18] ont ajouté du pigmentde maïs violet riche en cyanidine-3-glucoside à un régime riche en graisses et ont nourri des souris pendant 12 semaines. Ils ont constaté que par rapport à un régime riche en graisses seul, la teneur sérique en TG des souris était significativement réduite. Yamakoshi [19] et d’autres ont découvert que nourrir les lapins avec des procyanidines, la condition préalable des anthocyanes, peut réduire le niveau de LDL dans le sang des lapins et réduire la formation de plaque athérosclérotique. Sur la base des résultats de la recherche, on pense que les anthocyanes et les acides gras insaturés pourraient être les principales substances actives dans les extraits de riz noir qui exercent des effets antioxydants et lipidiques.

En savoir plus. Conclusion Conclusion

Dans cette étude, les principaux composants de l’extrait de riz noir ont été analysés et ont révélé qu’ils contenaient 43,43% d’anthocyanosides tels que le 3-glucoside de maïs, et 16,6% d’acides gras, dont 87,66% étaient des acides gras insaturés. L’administration de différentes doses d’extrait de riz noir peut réduire le taux de lipides sanguins des rats hyperlipidémiques et améliorer le stress oxydatif dans le corps. Il a été déduit que les anthocyanosides et les acides gras insaturés présents dans les extraits de riz noir Étaient la base matérielle importante pour les effets antioxydants et lipidiques du riz noir.

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