Les incroyables avantages de l’extrait de riz noir Cyanidin 3 Glucoside

Qu’est-ce que le cyanidine-3-glucoside?

Cyanidine-3-glucoside (Cy-3-glc,C3G) Est l’anthocyanoside le plus commun, largement distribué et abondant parmi le composé de l’anthocyanidine [1][2]. Le 3-glucoside de la fleur de maïs est couramment présent dans les feuilles, les fruits et les racines des plantes de couleur foncée, comme les plantes orange, rouge et pourpre, en particulier dans le riz noir [3]. Cornflower-3-glucoside est l’un des anthocyyanines dans le groupe anthocyanoside, et un grand nombre d’études au pays et à l’étranger ont montré que Cornflower-3-glucoside a une variété d’activités biologiques, telles que la prévention des maladies cardiovasculaires, l’amélioration de la fatigue visuelle, et la réduction des patients diabétiques et#39; Inflammation, et ainsi de suite.

Quelle est la Construction du Cyanidin-3-Glucoside?

L’anthocyanoside appartient aux flavonoïdes, il a donc la structure typique des flavonoïdes, c’est-à-dire C3-C6-C3 comme squelette de base, et c’est un dérivé du 2-phénylchromene [4]. Le parent de l’anthocyanoside est l’anthocyyanine, parce que l’anthocyyanine est instable, donc dans la nature, il est principalement l’anthocyyanine comme un ligand combiné avec d’autres sucres pour former différents glycosides, c.-à-d. les anthocyanosides. La plupart des anthocyanes ont des substitutions d’hydroxyle aux sites carbonés 3,5,7. Différents anthocyanosides sont formés en raison des différences dans les substituants de l’anneau b. Actuellement, les 6 Les anthocyanosides les plus communs dans la nature sont: cyanindine, pélargoninidine, delphinidine, peonidine, peunidine et malvidine. En raison des différents types, positions et quantités de sucre de liaison dans les anthocyanosides, les anthocyanosides sont également différents. Les principaux sucres de liaison sont les monosaccharides comme le glucose, la rhamnose, le galactose et le xylose, et les disaccharides comme le rhamnoglucose et l’acacia disaccharide [5]. La structure du 3-glucoside est montrée sur la figure 1-1, qui est formé par la combinaison de bleuet et un glucose.

Fig.1-1    Structure de Cyanidin-3-glucoside

Teneur en cyanine-3-glucoside dans l’extrait de riz noir

Selon la littérature, le contenu desCyanidin-3-GlucosideDans le riz noir est extrêmement riche [6] [traduction], et Jing Wang et al. [7] [traduction] ont conclu expérimentalement que la teneur en cyanidine-3-glucoside du riz noir peut atteindre (1,017 ± 0,028) mg/g.

Dans cette expérience, l’extrait de riz noir a été utilisé comme matériau expérimental, et son cyanidine-3-glucoside a été purifié par une colonne chromatographique avec trois types de remplissage, à savoir, la résine macroporeuse AB-8, le polyamide, et le gel de dextran, à son tour, pour obtenir cyanidine-3-glucoside, et la pureté pourrait atteindre 95% après calcul.

1 méthodes expérimentales

1.1. - le système Méthode technique

Préparation de cyanidine-3-glucoside à partir d’extraits de riz noir

Fig 2-1 Conditions de détection du produit de Cyanidin-3-Glucoside

1.2 analyse Qualitative et Quantitative de la cyanidine-3-glucoside dans l’extrait de riz noir

1.2.1 préparation des échantillons

Après lyophysique, la solution d’essai d’anthocyanine de riz noir, peser 10 mg de poudre lyophysique, la dissoudre dans de l’acide formique à 6% et porter à volume constant dans 10 mL, puis utiliser 0,2 μ.

Tableau 2-1 procédure d’élution par Gradient Pour UPLC

1.2.2 méthodes qualitatives et quantitatives

(1) (1) méthodes qualitatives

L’analyse qualitative des échantillons séparés et purifiés a été réalisée par colonne de chromatographie liquide à ultra-haute performance (UPLC) sous le balaiement des modes de surveillance des réactions multiples (MRM), combinée à des analyses ultraviolets (UV) et spectrométrie de masse (MS) en vérifiant le temps de rétention de la cyanidine-3-glucoside dans le contrôle cyanidine-3-glucoside et dans les extraits de riz noir isolés et purifiés.

(2) (2) (2) Méthode Quantitative

10 mg d’extrait de riz noir, A1, A2, A3, A4, B1, B2, B3, B4, B5 et C1 ont été pesés et condensé avec précision dans une fiole jactée de 100 ml contenant de l’acide formique à 6% et mesurés avec le témoin cyanidine-3-glucoside dans les mêmes conditions chromatographiques, puis la concentration de la solution préparée a été obtenue à partir de l’équation de la courbe standard et la pureté de chaque échantillon à analyser a été obtenue à partir du calcul de l’équation (2. 1).

1.3. - Isolement et Purification de cyanidine-3-glucoside à partir d’extraits de riz noir

1.3.1dégraissage des extraits de riz noir

1.3.2 préparation d’extraits d’anthocyanes à partir d’extraits de riz noir

1.3.3 isolement et Purification de la cyanidine-3-glucoside à partir d’extraits de riz noir

(1) séparation et Purification par Adsorption sur résine macroporeuse AB-8

(2) chromatographie sur colonne en Polyamide

(3) (2) séparation et Purification par chromatographie sur colonne de Gel

2. Résultats et Discussion

2.1analyse qualitative et Quantitative de la cyanidine-3-glucoside dans l’extrait de riz noir

2.2 optimisation des paramètres de spectrométrie de masse pour la Substance de référence du Cyanidin-3-Glucoside

Comme le montre la Figure 2-2.

2.3 analyse Qualitative de la cyanidine-3-glucoside dans l’extrait de riz noir

Sur la base des paramètres de spectrométrie de masse établis, le temps de rétention de la cyanidine-3-glucoside dans l’extrait de riz noir a été déterminé par chromatographie liquide à ultra-haute performance. Comme le montre la Figure 2-3 (A), le temps de rétention de la solution étalon de cyanidine-3-glucoside est de 3,46 minutes. Comme le montre la Figure 2-3 (B), le temps de rétention du maximum chromatographique principal dans la solution d’extraction de l’anthocyane du riz noir est de 3,46 minutes, de sorte que l’anthocyane principale du riz noir est la cyanidine-3-glucoside.

2.4 dosage de la cyanidine-3-glucoside dans l’extrait de riz noir

Tracez une courbe standard avec la concentration comme axe horizontal et l’aire de crête comme axe vertical, comme le montre la Figure 2-4. L’équation de régression Y= 79,027x + 85,746 (Y est l’aire de crête, X est la concentration), le coefficient de corrélation R2= 0,9991, et la relation linéaire de cyanidine-3-glucoside est bonne dans l’intervalle de 19,2 à 134,40 ng/ml.

Fig.2-3   Les chromatogrammes de riz noir et Cyanidine-3-glucoside ( C3G) norme

Tableau 2-2: taux de croissance annuel moyen   La zone de crête de la Solution Standard Cy-3-glc

Fig.2-4   La courbe Standard De C3G

2.5 isolement et Purification de la cyanidine-3-glucoside à partir de l’extrait de riz noir

2.5.1 méthode d’adsorption de résine macroporeuse AB-8

Figure 2-5  Les chromatogrammes d’anthocyanines d’extrait de riz noir

Fig.2-6   Les chromatogrammes de C3G séparés du riz noir par adsorption de résine macroporeuse AB-8

Note: Figure A: chromatogramme d’a1; Figure B: chromatogramme de A2; Figure C: chromatogramme de A3; Figure D: chromatogramme de A4

2.5.2 chromatographie sur colonne en Polyamide

Utilisation d’éthanol anhydre et d’éthanol à 80% pour effectuer l’élution par gradient avant sur des colonnes chromatographiques en polyamide contenant A1 et A4 en séquence, comme le montre la Figure 2-7. Selon le chromatogramme des résultats de détection UPLC-MS/MS, le Cy-3-g1c dans le riz noir a été séparé et purifié à l’aide de cette méthode, et l’heure de pointe était conforme aux résultats AB-8. Après calcul, la pureté de B1, B2, B3 et B4 était de 91,6 %, 92,3 %, 93% et 92%, respectivement. Par rapport aux A1 et A4, la pureté de la cyanidine-3-glucoside a été significativement améliorée après purification avec le polyamide, ce qui indique que la méthode de purification du polyamide a joué un rôle significatif dans la séparation et la purification de la cyanidine-3-glucoside dans l’extrait de riz noir.

Note: A: chromatogramme B1; B: chromatogramme B2; C: chromatogramme B3; D: chromatogramme B4; E: chromatogramme B5

2.5.3 chromatographie sur colonne sur Gel

La cyanidine-3-glucoside de grande pureté a été obtenue par la méthode de purification du polyamide, comme le montre la Figure 2-8. Sur la base du chromatogramme C1 des résultats de détection et de la comparaison avec le chromatogramme de B5, on constate qu’après la séparation et la purification de cyanidine-3-glucoside dans l’extrait de riz noir par cette méthode, aucun pic d’impureté n’a été constaté. Après la détection, la pureté de C1 a été calculée à 95%, avec une légère amélioration de la pureté, on voit que la chromatographie sur colonne en gel peut favoriser la séparation et la purification de la cyanidine-3-glucoside.

Après calcul, le taux de préparation de cyanidine-3-glucoside avec une pureté de 95% est 0,098%, qui est proche du laboratoire et#39; S détection antérieure d’une teneur en cyanidine-3-glucoside de 0,1 % dans le riz noir. En même temps, il ya une petite différence par rapport aux données obtenues par Wang Jing et al. [8] [traduction] avec une teneur en cyanidine-3-glucoside de (1,017 ± 0,028) mg/g, ce qui indique que la méthode utilisée dans cette expérience a un taux de préparation élevé et une grande pureté du composé obtenu, ce qui mérite une promotion répandue.

Fig.2-8 les chromatogrammes de C3G séparés du riz noir par une colonne de gel de glucose chromatographie

3. Résumé résumé

Cette étude a utilisé UPLC-MS/MS pour l’analyse qualitative et quantitative de la cyanidine-3-glucoside dans l’extrait de riz noir. En comparant le temps de rétention avec la substance de référence de cyanidine-3-glucoside dans les mêmes conditions de spectrométrie de masse, de phase liquide et d’uv, on peut conclure que l’anthocyanine monomère isolé et purifié d’extrait de riz noir est de la cyanidine-3-glucoside. Les résultats sont conformes à ceux rapportés dans la littérature.

Les incroyables avantages de l’extrait de riz noir Cyanidin 3 Glucoside

On rapporte que l’extrait de riz noir cyanidine-3-glucoside a de nombreuses activités physiologiques [10-13], telles que la récupération des radicaux libres [9], l’anti-oxydation [10], l’anti-inflammatoire, l’anti-tumeur [8], la prévention du diabète et l’amélioration de sa néphropathie [11][12][13], la protection du foie, la protection de la vue, et la protection du cerveau contre l’avc ischémique [14][15][16]. Comme rapporté dans la recherche, cyanidin-3-glucoside a un effet protecteur sur les lésions cérébrales post-ischémiques par le stress antioxydant, favorisant la synthèse endothéliale d’oxyde nitrique synthase, anti-inflammatoire, inhibant l’apoptose neuronale, et favorisant l’expression de chemokine plasmatique.

Hao et al. [6] ont montré que la cyanidine-3-glucoside peut réduire considérablement les niveaux élevés de créatinine sérique et d’azote uréique, ainsi que les niveaux de xanthine oxydase, de malondialdéhyde et d’oxyde nitrique dans les reins causés par le KBrO3 provoqué des lésions rénales graves chez les souris. Son effet protecteur sur les reins est la capacité de récupération des radicaux libres des anthocyanes. Zhang Chuyang et al. [17] ont utilisé la lignée hépatique hépatique humaine HepG-2 comme modèle pour étudier l’effet protecteur de la cyanidine-3-o-glucoside (C3G) sur le stress oxydatif induit par le H2O2 dans les cellules. Les résultats ont montré que la cyanidine-3-glucoside n’avait pas de toxicité significative pour les cellules hépatiques de l’ordre de 0-0,5 mmol/L; À haute (400 μ Mol/L), moyenne (200 μ Mol/L), faible (50 μ le traitement par cyanidine-3-glucoside à trois concentrations de Mol/L a augmenté significativement la capacité antioxydante totale, l’activité de superoxyde dismutase, et réduit la teneur en glutathion des cellules, tout en réduisant la teneur en malondialdéhyde intracellulaire. Song Nan et al. [18] ont étudié l’effet de la cyanidine-3-glucoside sur le métabolisme du glucose et des lipides chez Alzheimer' souris modèles de la maladie S (ma). Les résultats indiquent que la cyanidine-3-glucoside régule la résistance à l’insuline et la réponse inflammatoire par la voie JNK/AKT, améliorant efficacement les troubles du métabolisme du glucose dans le cerveau chez les souris modèles de la ma, mais ne régulant pas significativement le métabolisme des lipides, et peut inhiber le dépôt de plaques liées à l’âge dans l’hippocampe du cerveau.

Yu Renqiang et al. [19] avaient pour but d’étudier les effets de la cyanidine-3-glucoside sur le poids corporel, les lipides sanguins et la résistance à l’insuline chez les rats obèses. Des rats obèses ont été induits par un régime riche en graisses et divisés au hasard en un groupe témoin et un groupe expérimental. Le groupe expérimental a été gavé avec 100 mg/(kg · j) de cyanidine-3-glucoside, tandis que le groupe témoin a été gavé avec une quantité égale de solution saline physiologique. Après gavage continu pendant 5 semaines, les résultats ont montré que le poids corporel, la masse grasse viscérale, le taux moyen d’utilisation de l’énergie alimentaire, le cholestérol total, les triglycérides, le cholestérol de lipoprotéines de basse densité, l’indice d’artériosclérose, la glycémie à jeun, l’insuline sérique, et l’indice de résistance à l’insuline du groupe expérimental étaient significativement inférieurs à ceux du groupe témoin (r< 0,05), Alors que le cholestérol lipoprotéique de haute densité et l’adiponectine sérique étaient significativement plus élevés que ceux du groupe témoin (r< 0,05), ainsi, on peut conclure que la cyanidine-3-glucoside peut ralentir le poids corporel, augmenter la masse grasse viscérale, améliorer le glucose lié à l’obésité et les troubles du métabolisme des lipides et l’insuline résistance chez les rats obèses, et spéculer que son mécanisme pourrait être lié à l’augmentation de la sécrétion d’adiponectine sérique. Lin Huai et al. [18] ont étudié l’effet du 3-glucoside de bleuet sur les lésions hépatiques et rénales induites par le plomb dans le cadre d’expériences menées sur des rats. Les résultats ont montré que le 3-glucoside de bleuet avait un effet protecteur significatif sur les lésions hépatiques et rénales induites par le plomb, mais son mécanisme d’action doit encore être étudié.

Extrait de riz noir Cyanidin-3-Glucoside expérience:

La recherche sur le cyanidin-3-glucoside au pays et à l’étranger montre qu’il a une variété d’activités biologiques telles que la prévention des maladies cardiovasculaires, l’amélioration de la fatigue visuelle et la réduction de l’inflammation chez les patients diabétiques, mais la teneur en cyanidin-3-glucoside détectée dans le sang et les tissus connexes est extrêmement faible. La raison de ce paradoxe peut être que la cyanidine-3-glucoside subit des réactions métaboliques dans le tractus gastro-intestinal, produisant des métabolites apparentés qui entrent dans le sang et les tissus apparentés, entraînant des effets connexes sur l’activité biologique.

Cette étude vise à valider cette hypothèse, en utilisant la cyanidine-3-glucoside comme matériel expérimental, en utilisant des méthodes expérimentales in vivo et in vitro, et UPLC-MS/MS comme méthode de détection, pour analyser qualitativement et quantitativement les métabolites de la cyanidine-3-glucoside dans le tractus gastro-intestinal du rat, et explorer ses changements métaboliques dans le tractus gastro-intestinal du rat. En même temps, l’analyse des métabolites du cyanidin-3-glucoside dans le sang de rat a permis de clarifier l’absorption de ses métabolites dans l’organisme, ce qui a permis de déterminer si les métabolites du cyanidin-3-glucoside ont des activités biologiques pertinentes et de fournir une référence pour révéler le mécanisme d’activité du cyanidin-3-glucoside. Les principaux contenus de recherche et résultats du projet sont les suivants:

(1) Le riz noir a été utilisé comme matériau expérimental pour purifier la cyanidine-3-glucoside sur une colonne de gel de résine macroporeuse AB-8, de polyamide et de dextran. La teneur en cyanidine-3-glucoside après purification était de 95% et le rendement était de 0,098%.

(2) En utilisant le cyanidin-3-glucoside comme matériel expérimental et la méthode UPLC-MS/MS comme méthode de détection, les produits métaboliques et les principaux sites métaboliques du cyanidin-3-glucoside dans l’intestin du rat ont été étudiés à l’aide de la méthode d’incubation in vitro en solution. Les résultats ont montré qu’il y avait 11 métabolites de cyanidin-3-glucoside dans l’intestin du rat, y compris l’acide 2,4,6-trihydroxybenzoïque, l’acide protocatéchique, l’acide p-hydroxybenzoïque, l’acide vanillique, l’acide hippurique, l’acide caféique aldéhyde phénolique, l’acide p-coumarique, la cyanidin-3-glucoside, la cyanidine et l’acide férolique. Les principaux sites métaboliques sont le jéjunum, l’iléon et le côlon.

(3) En utilisant la cyanidine-3-glucoside comme matériel expérimental et la méthode UPLC-MS/MS comme méthode de détection, l’estomac, le duodéum, le jéjunum, l’iléon et le côlon des rats ont été prélevés à différentes périodes après gavage de cyanidine-3-glucoside. Les métabolites de la cyanidine-3-glucoside ont été détectés, et un total de 11 types ont été détectés, y compris l’acide 2,4,6-trihydroxybenzoïque, l’acide protocatéchique, l’acide p-hydroxybenzoïque, l’acide vanillique, l’acide caféique hippurique, le phloroglucinol aldéhyde, l’acide p-coumarique, la cyanidine-3-glucoside, la cyanidine et l’acide férolique, les types de produits sont en accord avec les résultats de la méthode in vitro, et la cyanidine-3-glucoside est principalement présent dans sa forme originale dans le suc gastrique, Alors que le cyanidin-3-glucoside est principalement présent sous forme d’aglycone (cyanidine) dans le duodénum, le jéjunum, l’iléon et le côlon.

(4) (2) En utilisant le cyanidin-3-glucoside comme matériau expérimental et la méthode UPLC-MS/MS comme méthode de détection, un total de 10 métabolites de cyanidin-3-glucoside dans le sang de rat ont été détectés, y compris l’acide protocatéchuïque, l’acide p-hydroxybenzoïque, l’acide vanillique, l’acide hippurique, l’acide caféique, est un aldéhyde phénolique, l’acide p-coumarique, la cyanidin-3-glucoside, la cyanidine et l’acide férolique. Cependant, l’acide 2,4,6-trihydroxy benzoïque n’a pas été détecté, ce qui indique qu’à l’exception de l’acide 2,4,6-trihydroxybenzoïque, D’autres métabolites intestinaux de cyanidin-3-glucoside peuvent être absorbés dans la circulation sanguine à travers l’intestin. Par comparaison, on a constaté que les principaux sites d’absorption sont le jéjunum, l’iléon et le côlon.

Les résultats de la recherche confirment que la cyanidine-3-glucoside subit des réactions métaboliques dans le tractus gastro-intestinal, entraînant une série de métabolites apparentés qui peuvent être absorbés dans la circulation sanguine par l’intestin.

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