Quelles sont les utilisations des Oligosaccharides de Mannan de qualité alimentaire dans l’alimentation des volailles?

Les Manno-oligosaccharides (MOS) sont largement présents dans la paroi cellulaire de nombreux micro-organismes, tels que la farine de konjac, la gomme de guar et le tanner' S gomme, etc. Les manno-oligosaccharides d’alimentation sont principalement dérivés de la paroi cellulaire de la levure. Les Manno-oligosaccharides (MOS) destinés à l’alimentation animale sont principalement dérivés d’une classe d’oligosaccharides extraits des parois cellulaires de la levure, avec du glucose ou du mannose comme molécule unité, et sont des mélanges de glycanes dimériques, trimériques ou tétramériques et d’autres composants structurels [1]. Ces dernières années,Mannan-oligosaccharides (MOS)Ont été largement utilisés comme additifs alimentaires dans la production animale, et ont le potentiel de remplacer les antibiotiques en tant qu’agents de santé animale en raison de leurs avantages de faible dosage, naturel, non-résidu, et haute stabilité, et leur capacité à réguler la santé physiologique du traire intestinal ainsi que leur double rôle dans l’immunomodulation.

1 propriétés physico-chimiques et effets des manno-oligosaccharides

1.1 propriétés physiques et chimiques

La douceur de l’oligosaccharide de mannan est inférieure au saccharose, soluble dans l’eau et certains solvants polaires, facile à précipiter ou à cristalliser dans les solvants organiques. Il est stable dans des conditions normales de pH physiologique et de traitement des aliments, et sa viscosité diminue avec l’augmentation de la température et augmente après refroidissement. Le MOS extrait de la paroi cellulaire de la levure a été traité à haute température (121 ℃, 20 min) dans le traitement des aliments, et sa structure et sa fonction sont restées intactes. Les Glycoligosaccharides et certains oligosaccharides fonctionnels ont une structure similaire avec de nombreuses fibres alimentaires, et certaines de leurs liens chimiques ne peuvent pas être brisées par les enzymes digestives et les changements acide-base dans l’intestin animal, donc, l’intestin grêle est presque incapable de détruire et d’utiliser les Glycoligosaccharides.

1.2 fonctions biologiques

Le MOS est structurellement stable, pas facilement digéré par les animaux et ne peut être utilisé par les bactéries nuisibles, mais peut être utilisé par les bactéries bénéfiques dans le tube digestif (par exemple, les bifidobactéries et les lactobacilles). MOS peut améliorer la composition des micro-organismes dans le tractus intestinal, ce qui a un effet bénéfique sur les soins de santé de l’hôte. Le MOS peut reconnaître, adhérer et exclure les bactéries nuisibles, ce qui accélère l’excrétion des bactéries nuisibles du tractus intestinal, améliore la fonction immunitaire non spécifique de l’animal, et augmente la résistance de l’organisme animal. Le MOS peut également être utilisé comme agent antimicrobien dans le tractus intestinal. MOS peut reconnaître et adhérer à certaines bactéries nocives, accélérer l’excrétion de bactéries nocives des intestins, améliorer la fonction immunitaire non spécifique des animaux et améliorer la résistance des animaux.

1.2.1 Impact sur la microécologie intestinale

L’effet du MOS sur l’environnement microécologique intestinal est principalement réalisé en favorisant la croissance et la reproduction de bactéries intestinales bénéfiques, ainsi que l’adhésion et l’exclusion de bactéries nuisibles. Puisque les parois cellulaires ou les villi des bactéries entéropathogènes (E. coli, Salmonella, Clostridium difficile, etc.) contiennent des lectines exogènes qui peuvent se fixer spécifiquement aux résidus de sucre dans les cellules de la paroi intestinale, et les probiotiques (Lactobacillus, etc.) n’ont pas de lectines exogènes, MOS n’a pas d’effet adhésif et d’exclusionnaire sur les bactéries bénéfiques.

Ghasemian et al. ont montré que les MOS oligomériques dans les régimes alimentaires pouvaient rapidement déloger E. coli adhérant à la paroi cellulaire épithéliale intestinale, tandis que le glucose et le galactose n’avaient aucun effet [2]. Ce mécanisme d’action a été démontré dans un certain nombre d’études expérimentales, et Guedes et al. ont constaté que l’ajout de MOS dans l’alimentation des lapins réduisait considérablement la concentration massique d’e. coli dans le cecum et le côlon, et augmentait la concentration massique de Lactobacillus et de Bifidobacterium dans le cecum [3]. Zhang et al. ont montré que le MOS pouvait augmenter significativement le nombre de bifidobactéries et de lactobacilles dans le cécum et l’iléon des poules pondeuses et diminuer le nombre d’e. coli dans le tractus intestinal [4]. Wen Ruozhu et al. ont montré queMOS pourrait favoriser la croissance de bactéries bénéfiquesTels que Lactobacillus et inhiber la croissance de bactéries nuisibles telles que Clostridium spp. dans l’intestin des poussins de chair en utilisant la technique PCR-DGGE [5].

1.2.2 effets sur la structure morphologique de l’intestin grêle

L’intestin grêle est le principal lieu d’absorption des nutriments, MOS peut changer la morphologie de la muqueuse de l’intestin grêle, augmenter la hauteur et la densité des villosités, de sorte que la zone d’absorption des villosités de l’intestin grêle peut être agrandi, ce qui est propice à la digestion et à l’absorption des nutriments dans le tractus intestinal. Meng Yan et al. ont ajouté l’oligosaccharide de mannan à l’alimentation des poulets de chair, et les résultats ont montré que l’oligosaccharide de mannan pourrait améliorer la hauteur des villosités intestinales, la profondeur des crypts, l’épaisseur des muqueuses et la surface des villosités dans l’intestin grêle, et favoriser la digestion et l’absorption dans l’intestin grêle, améliorant ainsi la performance de croissance des animaux [6].

Zhang et al. ont ajouté du MOS à l’alimentation des crevettes et ont montré qu’il favorisait le développement morphologique de la structure des microvillosités intestinales des crevettes et augmentait le taux de croissance spécifique de l’organisme [7]. Liu Aijun et al. ont étudié l’effet de l’oligosaccharide de mannan sur la structure intestinale et la fonction de l’oniola tilapia, et ont constaté que l’ajout de l’oligosaccharide de mannan pouvait augmenter de manière significative la hauteur, la largeur et la densité des petites villosités intestinales, ce qui favorisait l’expansion de la zone d’absorption intestinale et l’utilisation digestive des nutriments, améliorant ainsi la performance de croissance des organismes animaux [8].

1.2.3 régulation du système immunitaire du corps animal

Les MOS sont une nouvelle classe de substances antigéniquement actives qui sont immunogènes et stimulent le corps pour générer une réponse immunitaire. La réponse immunitaire spécifique du tractus gastro-intestinal des animaux est dominée par des anticorps, et les anticorps muqueuses tuent directement les bactéries en inhibant l’adhésion des bactéries envahissantes et des toxines à l’épithélium intestinal et en libérant des médiateurs. Ma Zhihong et al. ont testé des souris immunodéprimées et ont constaté que le taux de phagocytose des macrophages et l’indice phagocytique des souris du groupe MOS augmentaient de façon significative, ce qui indique que le MOS peut augmenter l’immunité non spécifique des souris [9].

Wu Chunzao et al. ont ajouté du MOS à l’alimentation des porcs et ont augmenté de façon significative la teneur en immunoglobulines dans le sérum (P< 0,05)[10]. Jin Yadong et al. ont ajouté l’oligosaccharide de mannan au lait des veaux, et ont constaté qu’il pouvait améliorer significativement la performance de croissance et la résistance immunitaire des bovins (P< 0,05)[11]. Wang Jiying et al. ont utilisé le ginseng comme objet de recherche et ont constaté que l’ajout de mannan oligosaccharide à l’alimentation pourrait améliorer l’immunité du ginseng[12]. En ajoutant différentes concentrations de mannan-oligosaccharides à l’alimentation des poulets de chair, Gao Lin a montré que les mannan-oligosaccharides avaient un effet positif sur les index d’immunité sérique des poulets de chair, ce qui pourrait améliorer le niveau d’immunité du corps et favoriser le développement des organes immunitaires [13]. You Jinming et al. ont constaté que l’ajout de mannan-oligosaccharides et de butyrate de sodium aux régimes alimentaires améliorait significativement la performance de croissance et la fonction immunitaire des porlets sevrés [14].

2 Application de lamanno-oligosaccharidesDans la Production animale

2.1 Aquaculture

L’ajout de mannan oligosaccharide à aquafeed est bénéfique pour augmenter le taux de croissance et l’efficacité de conversion alimentaire des animaux aquatiques. Liu Aijun et al. ont montré que l’ajout de MOS de 0,5 % à l’alimentation du tilapia pourrait augmenter le taux de gain de poids, la digestibilité de la matière sec et la digestibilité des protéines du tilapia [8]. Tan Chonggui et coll. ont montré que 0,4% de MOS améliorait significativement la performance de croissance de la crevette Penaeus vannamei, réduisait le coefficient d’appâte et augmentait significativement l’activité de certaines enzymes (p. ex., le lysozyme, l’enzyme gastro-blanche et la lipase hepato-pancréatique) (P< 0,05)[15].

Yu Yanmei et al. ont ajouté konjac mannan oligosaccharide 0,1%, 0,2%, 0,3% et levure mannan oligosaccharide 0,3% à l’alimentation de base de Pelteobagrus fulvidraco sain, et ont montré que le groupe konjac mannan oligosaccharide 0,2% avait le gain de masse le plus élevé et le coefficient d’appât le plus faible, et le groupe levure mannan oligosaccharide 0,3% a également considérablement contribué à la croissance de Pelteobagrus fulvidraco par rapport au groupe de contrôle, Mais les résultats n’étaient pas aussi bons que celui de konjac mannan oligosaccharide 0.2% groupe. Cependant, son effet n’était pas aussi bon que celui du groupe oligosaccharide mannan de konjac à 0,2% [16].

2.2 production de volaille

En aviculture, une quantité appropriée de MOS a un effet de promotion sur les bactéries bénéfiques (Lactobacillus et Bifidobacterium, etc.) dans le tractus gastro-intestinal, ce qui peut réduire la valeur ajoutée des bactéries pathogènes et améliorer l’immunité, réduisant ainsi l’apparition de maladies et améliorant la performance de production. Yan Guiling et al. ont montré que l’ajout de brasseries et#39; S l’oligosaccharide de mannan dérié de levure dans l’alimentation des poulets de chair a réduit de façon significative le nombre de spp. Escherichia coli et Salmonella dans le cecum (P< 0,05) et a amélioré la fonction immunitaire des poulets de chair [17]. Li Qilin et al. ont utilisé l’oligosaccharide de mannan comme substitut aux antibiotiques et ont constaté que l’ajout d’oligosaccharide de mannan était efficace pour augmenter le taux de survie, le gain de poids quotidien et réduire le rapport fourrages/poids des poulets de chair [18]. Xue Jun et al. ont montré que les mannan-oligosaccharides pourraient augmenter le gain de poids quotidien, l’apport et le taux de conversion alimentaire, et réduire la teneur en cholestérol de la cailles [19]. Wu Wei et al. ont ajouté l’oligosaccharide de mannan aux régimes alimentaires des poulets de chair et ont montré que l’oligosaccharide de mannan pouvait améliorer la performance des poulets de chair [20]. Zhu Xiuqian et al. ont montré que l’ajout de 0,2% d’oligosaccharide de mannan à l’alimentation augmentait significativement le gain de poids quotidien et le taux de conversion alimentaire des poulets de chair (P< 0,05)[21].

2.3 production porcine

Actuellement, la recherche sur le MOS chez les porcs se concentre principalement sur le stade porcelets, en particulier les porcelets sevrés, où le MOS a le double effet d’adsorption des pathogènes intestinaux et d’immunomodulation chez les porcelets. Hang Suqin et al. ont ajouté de l’oligosaccharide de mannan aux régimes alimentaires des porcelets et ont constaté que l’ajout d’oligosaccharide de mannan augmentait significativement le gain de poids quotidien et le taux de conversion alimentaire des porcelets par rapport au groupe témoin (P< 0,05), et améliorait la performance des porcelets [22].

Li Yuxin a constaté que le gain de poids quotidien et l’efficacité de conversion alimentaire des porcelets sevrés à 28 jours étaient significativement augmentés (P< 0,05) dans le groupe avec l’ajout de Picrorhizobium mannan 0,2% après avoir nourri 0,1%, 0,2% de Picrorhizobium mannan[23]. Wu Chunzao et al. ont montré que l’ajout de MOS aux régimes alimentaires des porcelets sevrés augmentait significativement le gain de poids quotidien des porcelets sevrés et réduisait le rapport fourrage/viande (P< 0,05)[10]. Duan Xudong a ajouté des oligosaccharides de mannan aux régimes alimentaires des porcelet et a montré que l’ajout de oligosaccharides de mannan aux régimes alimentaires des porcelet a amélioré la performance de croissance des porcelet et une partie de la réponse immunitaire non spécifique ainsi que l’environnement microécologique intestinal [24].

2.4 alimentation des ruminants

En raison de la forte dégradation des oligosaccharides dans le rumen des ruminants et de la digestion de la cellulose et de l’hémicellulose dans les aliments par les microorganismes du rumen produit également une grande quantité d’oligosaccharides, les oligosaccharides fonctionnels ont été moins étudiés dans la nutrition des ruminants. Xiao Yu et al. ont étudié les effets des oligosaccharides exogènes de mannan sur les indices biochimiques sériques et antioxydants chez les chèvres laitières, et les résultats ont montré que l’activité sérique de la malondialdéhyde et de la gammaglutaminase diminuait, tandis que la globuline sérique et le phosphore sérique augmentaient de manière significative, ce qui indique que l’addition de MOS peut augmenter la capacité antioxydante des chèvres laitières, et améliorer le corps et#39; S métabolisme lipidique et synthèse des protéines [25]. Gao Tingting et al. ont montré que les MOS, les fructooligosaccharides (FOS) et les oligosaccharides de soja augmentaient significativement la concentration d’acides gras volatils et de protéines bactériennes dans le bouillon de culture (P< 0,05) par la culture in vitro en lots [26]. Bao Yan'an et al. ont ajouté du MOS au régime alimentaire des vaches laitières et ont constaté qu’il augmentait considérablement la production de lait (P< 0,05) [27].

3 les principaux facteurs affectant l’effet des oligosaccharides de mannan

Il existe de nombreux facteurs qui affectent l’application de l’oligosaccharide de mannan aux animaux, parmi lesquels le type d’oligosaccharide de mannan est l’un des facteurs les plus importants, y compris le lien monosaccharide de l’oligosaccharide de mannan, la pureté et le degré de polymérisation de l’oligosaccharide de mannan, et l’activité biologique de l’oligosaccharide de mannan, etc., qui auront différents impacts sur son effet. Le niveau d’addition des oligosaccharides de mannan affectera également l’effet des oligosaccharides de mannan. L’ajout insuffisant d’oligosaccharides de mannan ne peut pas atteindre l’effet de la prolifération; L’ajout excessif d’oligosaccharides de mannan augmentera le coût des aliments, et se traduira par la mauvaise appétence des aliments, réduira la consommation des animaux, et peut causer la diarrhée chez les animaux. La microflore intestinale des animaux à différents stades de développement changera en fonction du stade de développement.

Par conséquent, l’âge de l’animal est un facteur direct affectant l’effet de mannan oligosaccharide, comme après le sevrage, la concentration d’e. coli et d’autres agents pathogènes chez les porcelets augmente, et les porcelets sont sensibles à la diarrhée à ce moment, de sorte que l’ajout d’une certaine concentration de mannan oligosaccharide à ce stade peut effectivement réduire la prolifération des bactéries pathogènes. En outre, l’effet synergique de l’oligosaccharide de mannan et d’autres substances affectera également son effet, tel que l’effet synergique de l’oligosaccharide et des prébiotiques, l’effet est meilleur que l’ajout simple, il peut prolonger le temps d’action des micro-organismes d’alimentation et le nombre de micro-organismes viables dans l’intestin, et favoriser les micro-organismes bénéfiques dans les intestins à coloniser et à se développer.

4 résumé

Il y a encore beaucoup de questions non réglées sur le mécanisme et l’effet de l’oligosaccharide de mannan, et la vulgarisation et l’application de l’oligosaccharide de mannan en aquaculture est encore quelque peu limitée. Par conséquent, il est nécessaire de renforcer la recherche sur la relation entre la structure physico-chimique des oligosaccharides de mannan et leurs fonctions, pour clarifier le mécanisme des oligosaccharides de mannan; Étudier la quantité appropriée d’oligosaccharides de mannan à ajouter dans différents états physiologiques de différents animaux et la façon d’ajouter des oligosaccharides de mannan, ainsi que les effets synergiques et vers le bas lorsqu’ils sont utilisés en association avec d’autres facteurs nutritifs ou additifs alimentaires (acidifiants, antibiotiques, biotinics), et mener des recherches systématiques sur les effets de différents types de régimes alimentaires sur les oligosaccharides de mannan. En même temps, les effets de différents types de régimes alimentaires sur les mannan-oligosaccharides ont été systématiquement étudiés afin de jeter les bases théoriques d’une application rationnelle des mannan-oligosaccharides dans les aliments.

Références:

[1] Q. Kou, M. Liang, L. Tao, et al. Recherche et application de mannan oligosaccharide[J]. Food and Feed Industry, 2012, 12(5): 57-59.

[2] Ghasemian M, Jahanian R. la supplémentation alimentaire en mannan-oligosaccharides pourrait affecter la performance, l’immunocompétence, les métabolites lipidiques du rhum, les populations bactériennes intestinales et la digestibilité des nutriments iléaux chez les poules pondeuses âgées [J]. Science de l’alimentation animale & Technology, 2016, 213: 81-89.

[3] Guedes C M, mourão J L, et al. Effets de l’âge et de l’addition de mo sur la production d’acides gras volatils dans le caecum du lapin [J]. Science de l’alimentation animale & Technology, 2009, 150(3): 330-336.

[4] ZHANG Jian-Bin, CHE Xiang-Rong, YANG Hua. Effets des mannan-oligosaccharides sur la flore intestinale des poules pondeuses [J]. Feed Expo, 2010(5): 29-30.

[5] WEN Ruo-Zhu, JIANG Yun, LIU Ze-Xing et al. Effets de l’oligosaccharide de mannan sur le développement du microbiote intestinal chez les poussins de chair [J]. Journal of Zhejiang University: Agriculture and Life Sciences, 2011, 37(1): 83-90.

[6] MENG Yan, ZHANG Hui. Effets de l’oligosaccharide de mannan sur les performances de croissance et la morphologie des muqueuses intestinales des poulets de chair [J]. China Feed, 2007(21): 30-32.

[7] Zhang J, Liu Y, Tian L, et al. Effets de l’oligosac - charide alimentaire de mannan sur la performance de croissance, la morphologie de l’intestin et le stress de la crevette blanche juvénile du pacifique, Litopenaeus vannamei[J]. Poisson & Shellfish Immunology, 2012, 33(4): 1 027-1 032.

[8] Liu Aijun, Leng Xiangjun, Li Xiaoqin, et al. Effets de l’oligosaccharide de mannan sur la croissance, la structure intestinale et l’immunité non spécifique de Oniola tilapia[J]. Journal de l’université de Zhejiang: Agriculture et Sciences de la vie, 2009, 35(3): 329-336.

[9] MA Zhi-Hong, JIN Jing, LIU Hong-Mei, etc. Effets des mannan-oligosaccharides sur la performance de croissance et la fonction immunitaire de la carpe commune [J]. Effets de l’oligosaccharide de mannan sur la croissance et la fonction immunitaire de la carpe [J]. Anhui Agricultural Science, 2010, 38(3): 1 291-1 292.

[10] WU Chun-zao, WANG Jian-hua. Effets des bactéries de l’acide lactique et de l’oligosaccharide de mannan sur la croissance et les indices biochimiques sériques des porcelets sevrés [J]. Jiangsu Agricultural Journal, 2011, 27(1): 94-99.

[11] JIN Yadong, ZHANG Lili, CHEN Shao-Shu, et al. Effets de l’ajout de mannan-oligosaccharides sur la performance de croissance, la flore fécale et les indices d’immunité sérique des veaux en lactation [J]. China Animal Husbandry and Veterinary Medicine, 2016, 43(11): 2 922-2 930.

[12] WANG Ji-Ying, SONG Zhi-Dong, LI Pei-Yu, et autres. Effets de la supplémentation alimentaire avec du galactomannan sur la croissance, la composition nutritionnelle de la paroi corporelle et l’immunité du ginseng juvénile [J]. Chinese Aquatic Sciences, 2014, 21(2): 310-319.

[13] Gao Lin. Effet de l’oligosaccharide de mannan sur la performance immunitaire des poulets de chair [J]. Agricultural Technology and Equipment, 2015(4): 56-58.

[14] YU Jinming, FU Jianfu, WANG Zirui, et al. Effets du butyrate de sodium et de l’oligosaccharide de mannan sur la performance de croissance et la fonction immunitaire des porcelets sevrés [J]. Effets du butyrate de sodium et de l’oligosaccharide de mannan sur la performance de croissance et la fonction immunitaire des porcelets sevrés [J]. Journal of Animal Nutrition, 2010, 22(2):346-351.

[15] TAN Chonggui, LENG Xiangjun, LI Xiaoqin, et al. Effets des polysaccharides, oligosaccharides et protéases sur la croissance, les activités enzymatiques digestives et l’immunité sérique non spécifique de Penaeus vannamei[J]. Journal of Shanghai Ocean University, 2013, 22(1): 93-99.

[16] YANMEI YU, ZHIXIN WU, XIAOXUAN CHEN. Effets de l’oligosaccharide de konjac mannan sur la fonction immunitaire non spécifique et la croissance de Pelteobagrus fulvidraco[J]. Journal of Huazhong Agricultural University, 2010, 29(3):351-355.

[17] YAN Guiling, YUAN Jianmin, LIU Yuming, et al. Effets de la brasserie#39; S levure mannan oligosaccharide sur la microbiologie intestinale et la fonction immunitaire des poulets de chair [J]. Effets de la brasserie#39; S levure mannan oligosaccharide sur la microbiologie intestinale et la fonction immunitaire des poulets de chair [J]. Journal of China Agricultural University, 2008, 13(6):85-90.

[18] LI Qi-Lin, LI Yan-Peng, WANG Shi-Chang. Effets du remplacement des antibiotiques par l’oligosaccharide de mannan sur les performances des poulets de chair [J]. Anhui Agricultural Science, 2008, 36(6): 2 350.

[19] XUE Jun, JU Guichun, ZHANG Aiwu. Effets de différents niveaux d’oligosaccharide de mannan sur les performances de croissance et le cholestérol sérique de cail [J]. Effets de différents niveaux de mannan-oligosaccharides sur les performances de croissance et le cholestérol sérique de la perdrix [J]. Journal of Economic Zoology, 2008, 12(1): 30-33.

[20] WU Wei, ZHENG Yunduo, JIA Linan, et al. Effets de l’oligosaccharide de mannan sur la performance de croissance précoce et les indices physicochimiques des poussins de chair [J]. Effets de l’oligosaccharide de mannan sur la performance de croissance précoce et les indices physicochimiques connexes des poussins de chair [J]. Chinese Poultry, 2017, 39(1): 34-37.

[21] ZHU Xiuqian, ZHANG Jinghai. Effets des mannan-oligosaccharides et des herbes chinoises sur la performance des poussins de chair [J]. Shandong Animal Husbandry and Veterinary Medicine, 2011, 32(10): 1-3.

[22] pendez Suqin, HUANG Ruihua, ZHU Weiyun. Effets des mannan-oligosaccharides sur les performances de production et les indices biochimiques sanguins des porcelets sevrés [J]. Chinese Journal of Veterinary Science, 2009, 29(2): 220-223.

[23] Li Yuxin. Effets de Picrorhizobium hippocastanum mannan sur la performance de production et l’immunité des porcs [D]. Beijing: université agricole de Chine, 2015.

[24] Duan Xudong. Effets des mannan-oligosaccharides alimentaires sur la performance de reproduction, la fonction immunitaire, la croissance de la progéniture, l’immunité et les micro-organismes intestinaux chez les truies [D]. Mon 'an: université d’agriculture du Sichuan, 2013.

[25] XIAO Yu, LIN Yingting. Effets des oligosaccharides de mannan sur la fonction immunitaire des animaux [J]. Feed Research, 2010(7): 27-28.

[26] Gao Tingting, Qu Mingren, Wang Chengwei. Oligosaccharides fonctionnels et leurs applications dans la production de ruminants [J]. China Feed, 2010(21): 12-16.

[27] Bao Yan'an, Xing Shufang, Xu Qinglong. Effets des oligosaccharides de mannan sur le rendement laitier et la routine laitière des vaches Holstein [J]. Feed Research, 2009(2): 57-60.