Les extraits de Cistanchis Tubulosa sont-ils sûrs dans les aliments sains?

CistanchetubulosaEstunetigecharnue séchée avec des feuilles écailleuses de Cistanche tubulosa (Schrenk...........................................................................................................................................................................................................................................................................................................................................................................................................................................) R. Wight, une plante parasitaire vivace [1]. Cistanche tubulosa (Schrenk.) R. Wight est une plante parasitaire vivace [1]. Il a les effets de tonifier les reins et le yang, au profit de l’essence et du sang, humidifiant les intestins, et laxatif [2], et il est également connu sous le nom de «ginseng du désert». Des études pharmacologiques modernes ont également montré qu’il a divers effets pharmacologiques tels que l’amélioration de la fonction rénale, anti-fatigue, abaisser la pression artérielle, anti-vieillissement, et la régulation de la fonction immunitaire [3-4].

Cistanchis tubulosa has a long history of use in Xinjiang due to its remarkable pharmacological activity. In 2005, Japan&#Le ministère de la santé et du bien-être social (MHLW) a approuvé sa demande alimentaire. Le développement de produits alimentaires de santé connexes a une grande valeur d’application. L’extrait de Cistanchis tubulosa est-il une matière première sûre pour une alimentation saine, et quelle est sa sécurité et sa dose de consommation?

Dans cette étude, la sécurité desCistanchis tubulosa extract was evaluated by acute oral toxicity test, A-mes test, mouse bone marrow polymorphic erythrocyte micronucleus test, mouse spermatozoa deformity test, and teratogeny test, to provide an adequate scientific basis for its development and application.

1. Matériaux et méthodes

1.1 principaux instruments et équipements Et réactifs

Balance électronique du plateau supérieur MD200-3, pesée électronique, microscope à double pupille CXA Olympus, stéréomicroscope à zoom continu de type XTL-I, trancheuse rotative à paraffine 500, déshydrateur automatique de tissus biologiques TS-12H, machine de gel et d’enrobage de tissus biologiques BM-VI, microscope LEIT220, analyseur d’hématocrite Myriad BC-3000, analyseur d’hématocrite Myriad BC-2800Vet, biochimie automatique Roche-400. Analyseur de cellules sanguines, analyseur de cellules sanguines Myers BC-2800Vet, biochimie automatique Roche-400.

1.2 méthodes

1.2.1 essai de toxicité orale aiguë

20 mice of Kunming breed, body mass 18~22 g, half male and half female. Weigh 25 g of Cistanchis tubulosa extract, add sterile distilled water to 100 mL, and then give the extract to the mice twice at intervals of 3h at the rate of 20 mL/kg-bw. After gastric gavage, the mice were observed continuously for 14d, and the toxicity and deaths were recorded.

1.2.2 Test du micronoyau de la polycythémie Vera de moelle osseuse de souris (PCE)

50 souris de la race Kunming, de masse corporelle de 25~30 g, ont été réparties au hasard en 5 groupes, moitié mâles et moitié femelles. La méthode de gavage oral a été utilisée deux fois à intervalles de 24h, et les groupes d’extrait de Cistanchis tubulosa à doses faibles, moyennes et élevées (1,5, 3,0 et 6,0 g/kg p.c.), témoin négatif (eau distillée stérilisée) et témoin positif (40mL/kg p.c. cyclophosphamide, 10mL/kg p.c. injection intrapéritoneale) ont été mis en place.

 Les animaux ont été tués par luxation cervicale 6h après la dernière administration de la substance d’essai, et l’échantillonnage et la préparation de routine de 10.000 tranches ont été effectués. 1 000 érythrocytes polymorphes de moelle osseuse ont été dénombrés chez chaque souris, le nombre d’érythrocytes polymorphes contenant des micronoyaux a été observé, et 200 érythrocytes polymorphes ont été dénombrés, et le rapport entre le nombre d’érythrocytes polymorphes et les érythrocytes matures (PCE/RBC) a été observé, et le taux de micronoyaux a été calculé comme le taux de micronoyaux (‰). Taux du micronoyau (‰) = (nombre d’érythrocytes polycytophiles avec des micronoyaux/nombre total d’érythrocytes polycytophiles) × 100%.

1.2.3 souris Test de déformation du sperme

Vingt-cinq souris mâles de la race Kunming de qualité propre, d’une masse corporelle de 26 à 33 g, ont été réparties au hasard en cinq groupes. La quantité de substance d’essai, de préparation de solution et de gavage était la même que celle du test du micronoyau, et le témoin positif (45 mL/kg p.c. cyclophosphamide) a été injecté par voie intrapéritoneale à 11,25 mL/kg p.c. une fois par jour pendant 5 jours consécutifs. 30 jours après la dernière administration de la substance d’essai, le témoin positif a été injecté dans la cavité abdominal à 11,25 mL/kg p.c. Les animaux ont été mis à mort 30 jours après la dernière administration du matériel d’essai, 5000 spermatozoïdes à structure complète ont été comptés dans le filtrat des testicules, colorés à l’éosine, et l’incidence des spermatozoïdes aberrants (%) a été calculée. Incidence des spermatozoïdes aberrants (%) = (nombre de spermatozoïdes aberrants/nombre total de spermatozoïdes) × 100%.

1.2.4 la politique de l’emploi Test d’ames

L’essai d’ames a été réalisé avec les souches TA97 - les, Le numéro de téléphone, Le TA100, TA102 - le, déficientes en histidine de Salmonella typhimurium, et les enzymes microsomales du foie de rat (S9) induites par les biphényles polychlorés (BPC). Il y avait cinq groupes de doses (0,008, 0,040, 0,200, 1.000, 5.000 mg/ boîte), le groupe réverbérant spontané, le groupe témoin solvant (eau distillée) et le groupe témoin positif (mutagènes). Agents positifs: - S9: TA97 et TA98 étaient 2,4,7-trinitrofentanone (0,2 μg/ vaisselle), TA100 était de l’azide de sodium (1,5 μg/ vaisselle) et TA102 était de la mitomycine C (4 μg/ vaisselle). +S9: TA97, TA98 et TA100 étaient du 2-aminophène (10 μg/ plat), et TA102 était du 1,8-dihydroxyanthraquinone (50 μg/ plat). Observez les changements dans le nombre de colonies révértantes dans chaque groupe.

1.2.5 essai tératogène

Classe propre SD 100 rats femelles, masse corporelle 208~380 g, 60 rats mâles, masse corporelle 302~450 g, rapport d’accouplement de 2:1 entre mâle et femelle.

Pas moins de 12 rats gravides de chaque groupe ont reçu des doses de 0,25, 0,50 et 1,00 g/kg p.c. d’extrait de Cistanchis tubiflora du 7e au 16e jour de gestation, chaque groupe a été gavé à 10 mL/kg p.c. et le témoin solvant était de l’eau distillée. Le 20e jour de la gestation, l’utérus a été disséqué et pesé, le nombre de mortinaissances et de fœtus vivants a été enregistré et examiné, la masse corporelle et la longueur des fœtus ont été enregistrées, et l’apparence des fœtus a été examinée pour détecter toute anomalie. 50% des fœtus ont été soumis à un examen squelettique, et les autres 50% ont été soumis à un examen viscéral.

1.3 traitement statistique

Les données ont été transformées et analysées statistiquement à l’aide de PEMS3.1For Win-dows. Une ANOVA à sens unique A été utilisée pour la comparaison globale si la variance des données était concordante, et un test de Dunnett&#L’essai 39; S a été utilisé pour comparer les groupes posologiques avec le groupe témoin si la variance était concordante. Si la variance n’était pas homogène, un test non paramétrique (test de la somme des rangs) a été utilisé à la place. Le test du chi carré a été utilisé pour les données de comptage. Le test du micronoyau de la moelle osseuse polychromatique de l’érythrocyte de souris et le test d’aberration des spermatozoïdes de souris ont été effectués conformément à l’empoisson' distribution S avec un niveau d’essai de α = 0,05. Le niveau d’essai était α= 0,05.

2. Résultats obtenus

2. Les droits de l’homme 1 essai de toxicité orale aiguë 

After gavage at a dose of 10 g/kg-bw, no adverse signs were observed for 14 d. There were no obvious symptoms of poisoning and no deaths. Anatomical examination of major organs showed no significant abnormal changes. The maximum tolerated dose (MTD) in acute oral toxicity test in both male and female mice was >10 g/kg-bw. The extract of Cistanchis tubulosa is of practically non-toxic grade.

2.2 souris Moelle osseuse polymorphophile érythrocyte Test du micronoyau

Après gavage, le taux de micronoyaux de moelle osseuse des souris dans les groupes posologiques mâles et femelles n’a pas changé de façon significative (le nombre de spce examinées était de 5000), et la différence entre le taux de micronoyaux érythrophiles dans chaque groupe posologique et celui du groupe témoin négatif n’était pas statistiquement significative (P et gt; 0,05), tandis que le taux de micronoyaux dans le groupe témoin positif était plus élevé que celui du groupe témoin négatif, avec une différence statistiquement significative (P et lt; 0,01), c’est-à-dire que les résultats du test des micronoyaux de Cistanches tuberculosis étaient négatifs. Les résultats du test du micronoyau de l’extrait de Cistanche tubiflora ont été négatifs, comme le montre le tableau 1.

2. Les droits de l’homme 3 Test de déformation du sperme chez la souris

Le taux d’aberration des spermatozoïdes chez les souris mâles n’a pas été modifié de façon significative pour chaque groupe administré, et la différence n’était pas statistiquement significative lorsqu’on la compare à celle du groupe témoin négatif (P et gt; 0,05), tandis que le taux d’aberration des spermatozoïdes du groupe témoin positif était plus élevé que celui du groupe témoin négatif, et la différence était statistiquement significative (P et lt; 0,01). La différence était statistiquement significative (P et lt; 0,01), indiquant que l’extrait de Cistanchis tubulosa n’a pas produit d’effet aberrant sur les spermatozoïdes des souris, comme le montre le tableau 2.

2.4 essai d’ames   

Le nombre de colonies mutantes dans chaque groupe recevant la dose ne représentait pas plus de deux fois le nombre de colonies mutantes spontanées, et il n’y avait pas de relation dose-réflexion, tandis que le nombre de colonies mutantes spontanées dans le groupe témoin positif était significativement plus élevé que celui des colonies mutantes spontanées. Par conséquent, aucun effet mutagène n’a pu être observé chez les souches TA97, TA98, TA100 et TA1024 déficientes en acide histolytique avec ou sans addition de S9, comme le montre le tableau 3.

Tableau 1: taux de croissance annuel moyenRésultats du test du micronoyau pour les érythrocytes polychromatiques de moelle osseuse de souris (x- ± S, n=5)

Note: par rapport au groupe témoin négatif, * P < 0.05.

Tableau 2: taux de croissance annuel moyenRésultats d’un Test de déformation du sperme chez la souris

Note: par rapport au groupe témoin négatif, * P < 0.05.

Tableau 3: taux de croissance annuelsRésultats du test d’ames (x- ± S)

2. Les droits de l’homme 5 Test tératogène

En comparant les indicateurs et les taux de mortinatalité des rats gravides et des fœtus dans chaque groupe dose avec ceux du groupe témoin, les différences n’étaient pas statistiquement significatives (P et gt; 0,05); Aucune malformation n’a été décelée dans les organes internes des fœtus de chaque groupe, mais l’examen du squelette des animaux de chaque groupe administré et du groupe témoin a révélé que le sternum de chaque fœtus n’était pas entièrement ossifié. Selon la norme d’évaluation du test de tératogénicité dans GB15193-2003, aucun effet tératogène n’a été observé dans chaque groupe de doses.

3. Conclusion Conclusion

To provide a more adequate basis for the development of Cistanchis tubulosa related products, the safety of Cistanchis tubulosa extract was evaluated in this study. The acute oral toxicity test showed that the extract of Cistanchis tubulosa was practically non-toxic with a maximum tolerated dose (MTD) of >10 g/kg-bw; the results of three genotoxicity tests (Bone Marrow Micronucleus Test (BMMT), Sperm Abnormalities Test (SAT), and Ames Test (AMT)) were negative, indicating that the sample was non-mutagenic. The results of three genotoxicity tests (bone marrow micronucleus test, sperm deformity test, and Ames test) were all negative, indicating that the sample had no mutagenic effect. Cistanchis tubulosa extract has good safety and can be used to develop healthy food.

Références:

[1] Commission nationale de la pharmacopée. Pharmacopée nationale du peuple ' république de Chine: partie I [S]. Édition 2010. Beijing: Chemical Industry Press, 2010: 126.

[2] Hou Zhi-Hua, Chang Guo-Wen. État d’avancement des études pharmacologiques sur Cistanchiakis[J]. Journal of Chinese National Medicine, 2003, 9(4) : 3-4.

[3] JIN Xiulian, ZHANG Qingrong. Progrès de la Composition chimique de Cistanchiakia[J]. Chinese Journal of Traditional Chinese Medicine, 1994, 19(11): 695-697.

[4] Li Yong, Xiong Yuanjun, Jia Xiaoguang, et al. Effets de l’extrait de Cistanchis tubulosa sur la pression artérielle, la fluidité de la membrane érythrocyte et la viscosité du sang total chez les rats nourris avec un taux élevé de sel [J]. Natural Products Research and Development, 2009, 21(5): 220-222.